A  CASE  DEPENDING  ON  THE  VICTIMS  STATEMENTS

Pela avaliação da expressão de mARN foi possível inferir que após estimulação específica com extractos de ácaros do pó doméstico, as crianças sibilantes apresentavam uma inibição da expressão de CTLA-4 ao passo que as crianças saudáveis expressavam CTLA-4, sendo esta diferença de expressão estatisticamente significativa. Pela avaliação das crianças sibilantes em relação ao risco de asma, verificou-se que as de alto risco de asma apresentavam uma inibição de expressão de CTLA-4, enquanto as crianças de baixo risco de asma e as crianças saudáveis apresentavam expressão de CTLA-4, sendo esta diferença estatisticamente significativa na comparação das crianças de alto risco com as saudáveis.

Estes resultados corroboram os encontrados na avaliação das populações celulares por citometria de fluxo, podendo mais uma vez especular-se que nas crianças de alto risco existe uma diminuição de populações celulares com função supressora, sendo reconhecido o papel do CTLA-4 como molécula major de supressão.228,229

O presente estudo é também corroborado por Haddeland e colaboradores, que estudaram o sangue do cordão de um grupo de recém-nascidos com história familiar de alergias em comparação com grupo controlo documentando o aumento da expressão de CTLA-4 por citometria de fluxo nas células de cordão estimuladas com β- lactoglobulina nas saudáveis.281

Saliente-se porém que esta expressão era essencialmente pronunciada nas células CD4CD25forte,281 encontrando-se também descrito que a expressão de CTLA-4 é potenciada pela estimulação com PHA nas células CD4+CD25+ e não nas CD25-.219

Num estudo efectuado por Hellings e colaboradores, o bloqueio da expressão de CTLA-4 em ratinhos geneticamente predispostos para alergia potenciou a sensibilização alergénica e a inflamação eosinofílica alérgica das vias aéreas.628

Não se registaram diferenças para a expressão de mARN para Foxp3, defendido por alguns autores como marcador específico das células reguladoras,149,237,239,240 à semelhança dos resultados encontrados na avaliação por citometria de fluxo.

Estes resultados encontram-se de acordo com um estudo que não documentou diferenças na expressão de Foxp3 em culturas de células do cordão com extractos de ácaros do pó doméstico entre filhos de mães atópicas e não atópicas.290

Refira-se que a conceptualização do Foxp3 como marcador específico das populações de células reguladoras permanece muito discutível porquanto este marcador surge nas células activadas.246

Existem na literatura internacional estudos que demonstram a menor expressão de mARN para as moléculas Foxp3, em culturas celulares com alergénios em indivíduos com asma e em crianças com alto risco de asma e até mesmo aumento da sua expressão em agudizações da doença ou após terapêutica com corticosteróides.282,284-289

A expressão de CTLA-4 e de Foxp-3 em cultura de células com PMA encontrava-se diminuída nas crianças sibilantes em comparação com as crianças saudáveis, embora sempre revelando alguma expressão, demonstrando a existência de proliferação celular. Refira-se no entanto que não foi possível inferir diferenças significativas quanto à sua expressão na comparação entre os grupos de crianças de alto e baixo risco para asma e o grupo de crianças saudáveis.

Estes resultados encontram-se de acordo com os publicados por Schaub e colaboradores290 em que as células de cordão de crianças filhas de mães atópicas estimuladas com peptidoglicano, não apresentavam diferenças significativas para a expressão de mARN para Foxp3 nem para CTLA-4, em relação às crianças filhas de mães não atópicas. Do mesmo modo e à semelhança deste estudo, também documentaram uma tendência para menor expressão de Foxp3 nas crianças de alto risco (filhas de mães atópicas), embora sem significado estatístico.290

Pela avaliação da expressão de mARN para citocinas, não se encontraram diferenças na expressão de citocinas de papel regulador tal como a IL-10 e TGF-β, nas culturas com PMA, nem nas culturas com extractos de ácaros, o que se encontra uma vez mais de acordo com os resultados obtidos no estudo de Schaub e colaboradores 290.

Yang e colaboradores não documentaram diferenças na expressão de mARN para IL-10 em células do cordão umbilical de recém-nascidos estimuladas com mitogénios, em crianças com alto risco e crianças de baixo risco para doenças atópicas, definido pela história familiar.629

Neste sentido, também será interessante verificar que num estudo efectuado por Koning e colaboradores não foram encontradas diferenças na expressão de mARN para IL-10 em células mononucleares de sangue periférico entre crianças asmáticas e o grupo controlo.630

Existem estudos que documentam menor expressão de mARN para IL-10 em indivíduos asmáticos,266,267 _{postulando-se que nas doenças alérgicas pode existir um desequilíbrio}

entre as células T reguladoras produtoras de IL-10 e as células Th2.271

A ausência de diferenças estatisticamente significativas na expressão de Foxp3 e também na expressão de TGF-β, particularmente nas culturas com extractos de ácaros, encontra-se em consonância com a literatura internacional uma vez que a presença de TGF-β constitui um elemento chave para a expressão de Foxp3.243

No presente estudo a ausência de diferenças nesta expressão pode reforçar a inexistência de diferenças na expressão de Foxp3, bem como na avaliação por citometria das populações de células reguladoras, entre as crianças com alto e baixo risco para asma brônquica. Deve salientar-se que estas conclusões estão em consonância com outros estudos na literatura já referidos, quer na avaliação por citometria de fluxo, quer na expressão de mARN.

Torna-se particularmente importante enfatizar que a expressão de mARN para IFN-γ na cultura com extractos de ácaros com leitura ao 7º dia, se encontrava significativamente diminuída nos sibilantes em relação ao grupo controlo. Por outro lado, também se verificou uma diminuição da sua expressão, estatisticamente significativa nas crianças de alto risco em relação ao grupo controlo, bem como em relação às crianças com baixo risco de asma, sendo mesmo o único parâmetro quanto à expressão de mARN que

permitiu destrinçar as crianças de alto e baixo risco de asma. A inibição da expressão para esta citocina só se verificou uma vez mais para a cultura com extractos de ácaros e não para a cultura com PMA, em que apesar das diferenças não serem estatisticamente significativas, se verificou a existência da sua expressão, decorrente da proliferação celular.

É reconhecido que ocorre produção de IFN-γ pelas células Th1, sendo esta citocina um

potente inibidor da resposta Th2. Por outro lado é também sabido desde há alguns anos

que em asmáticos e doentes atópicos existe um perfil Th2, com supressão da resposta

Th1. É actualmente aceite que células de cordão umbilical estimuladas apresentam um

perfil Th2 e diminuição do padrão Th1, condicionando o risco de desenvolvimento

posterior na vida de uma doença atópica.631-633

Vários estudos têm comprovado especificamente uma reduzida produção de IFN-γ em crianças que desenvolveram posteriormente doenças atópicas,634-636 _{havendo no entanto}

outros estudos em que esta possível associação não se verificou.637-639

Kondo e colaboradores, num estudo prospectivo de recém-nascidos até aos 6 anos de idade, comprovaram que as crianças com asma brônquica, dermatite atópica ou rinite aos 6 anos de idade tinham uma produção significativamente inferior de IFN-γ em células do cordão estimuladas com alergénio (ovalbumina, albumina bovina sérica).635 No estudo de Tucson, efectuado por Martinez e colaboradores, a reduzida produção de IFN-γ por células mononucleares de sangue periférico estimuladas, após o nascimento e aos 3 meses de vida, estaria associada a um risco elevado de sibilância recorrente no primeiro ano de vida.640

Por outro lado, vários estudos comprovaram uma reduzida produção de IFN-γ em células do cordão ou células mononucleares em sangue periférico estimuladas com alergénio, nas crianças com alto risco de doenças alérgicas definido pela história familiar em relação às crianças de baixo risco,641,642 não sendo no entanto esta associação consensual, uma vez que não foi comprovada noutros estudos uma menor expressão mARN para IFN-γ.629,643

No estudo de coorte de recém-nascidos efectuado por van der Velden e colaboradores, foi documentada a existência de uma produção aumentada de citocinas de perfil Th2 em