3. Analysis of the draft directive
3.5. Missing aspects
3.3.1
Oxidação alílica do acetato de desidroepiandrosterona
I
. Num balão de fundo redondo de 50mL dissolveu-se acetato de DHEA (0,25mmol) num solventede acetonitrilo:água (2:1; 3mL). À solução previamente estabilizada à temperatura de 50ºC adicionou-se lentamente NaClO2 (sólido, 80%) (0,375mmol) e NHPI (0,025mmol). A reação decorreu, com agitação magnética e à temperatura de 50ºC, durante 6 horas, sendo a mesma completa. O controlo da reação foi feito por CCF com um eluente de éter etílico:éter de petróleo 40-60oC (1:1).
A reação foi parada e a mistura reacional foi colocada em contacto com uma solução de sulfito de sódio a 10% (40ml), durante várias horas. De seguida, fez-se extração com acetato de etilo (3x 40mL) e posterior lavagem da fase orgânica com solução saturada de bicarbonato de sódio (20mL) e água destilada (20mL), secou-se com sulfato de sódio anidro, filtrou-se e evaporou-se à secura, obtendo-se um produto sólido branco, que foi seco na estufa a vácuo [9], 0,0551g, η=64%.
1H (CDCl3, 400 MHz) δ 0,82 (s,3H,18-H3), 1,17 (s, 3H, 19-H3), 1,98 (s, 3H, CH3CO), 4,65 (m,1H, 3α-H), 5,58 (s, 1H, 6H)
II.
À reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.I, foi adicionado um catalisador de cério [Ce(NH4)2(NO3)6] (0,025mmol), imediatamente após a adição do NHPI. A reação decorreu durante 6 horas observando-se formação de produto, mas sem consumo total do substrato, não tendo sido realizada extração.III.
À reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.I, foi adicionado um catalisador de bismuto (BiCl3) (0,025mmol). A reação decorreu durante 6 horas. Após extração e isolamento do produto realizados de forma similar à reação descrita em à 3.3.1.I, foi obtido um óleo esbranquiçado; 0,753g (η=87%).IV.
À reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.I, foi adicionado um catalisador de bismuto [Bi(OTf)3.xH2O] (0,025mol). A reação decorreu durante 6 horas, observando-se formação de produto, mas sem se observar consumo total do substrato não tendo sido realizada extração.V.
À reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.I, foi adicionado um catalisador metálico de vanádio [VO(acac)2]. A reação decorreu durante 6 horas, sem se observar consumo total do substrato, não tendo sido realizada extração.VI.
Na reação realizada em condições semelhantes a 3.3.1.V, foi usado 0,0125 mmol do catalisador metálico [VO(acac)2] e 0,05mmol de NHPI. A reação decorreu durante 6 horas, sem se observar consumo total do substrato, não tendo sido realizada extração.VII.
Na reação realizada em condições semelhantes a 3.3.1.III, a quantidade de NaClO2 foi alterada para 0,75mmol, a de NHPI para 0,05mmol e a de BiCl3 para 0,0125 mmol, tendo-se observado o consumo total do substrato ao fim de 15 minutos. Após extração e isolamento efetuado de forma similar à reação 3.3.1.I, obteve-se um produto em óleo; 0,0670g (η=77%).VIII
. Na reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.V, a quantidade de NaClO2 foi alterada para 0,75mmol, a de NHPI para 0,05mmol e a de [VO(acac)2] para 0,0125 mmol, tendo- se observado o consumo total do substrato ao fim de 15 minutos. Após extração e isolamento efetuado de forma similar à reação 3.3.1.I, obteve-se um produto em óleo; 0,0673g (η=78%).IX.
Na reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.VIII, a quantidade de NaClO2 foi alterada para 0,5625mmol, tendo-se observado o consumo total do substrato ao fim de 15 minutos. Após extração e isolamento efetuado de forma similar à reação 3.3.1.I, obteve-se um produto em óleo; 0,0446g (η=51%).X.
Na reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, a quantidade de catalisador foi alterada para 0,004mmol, tendo-se observado o consumo total do substrato ao fim de 30 minutos. Após extração e isolamento efetuado de forma similar à reação 3.3.1.I, obteve-se um produto em óleo; 0,0551g (η=64%).XI.
A reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, decorreu à temperatura ambiente (15-20ºC), tendo a reação decorrido durante 6 horas, sem se observar consumo total do substrato, não tendo sido realizada extração.XII.
A reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, decorreu à temperatura de 25oC, tendo-se observado o consumo total do substrato ao fim de 3 horas. Após extração e isolamento efetuado de forma similar à reação 3.3.1.I, obteve-se um produto em óleo; 0,0426g (η=51%).XIII.
Na reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, foi usado alternativamente o catalisador V2O5, tendo-se observado o consumo total do substrato ao fim de 15 minutos. Após extração e isolamento efetuado de forma similar à reação 3.3.1.I, obteve-se um produto em óleo; 0,0419g (η=49%).XIV.
Na reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, foi usado alternativamente o catalisador Na3VO4, tendo-se observado o consumo total do substrato ao fim de 4 horas. Após extração e isolamento efetuado de forma similar à reação 3.3.1.I, obteve-se um produto em óleo; 0,680 (η=79%).XV.
Na reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, foi usado alternativamente o catalisador NH4VO3, tendo-se observado o consumo total do substrato ao fim de 1 hora. Após extração e isolamento efetuado de forma similar à reação 3.3.1.I, obteve-se um produto em óleo; 0,0654 (η=76%).XVI.
Na reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, foi utilizando o TEMPO em vez de NHPI. A reação decorreu durante 6 horas, sem se observar consumo total do substrato, não tendo sido realizada extração.XVII.
A reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, mas utilizando o TBHP (solução aquosa a 70%) em vez de NaClO2 decorreu durante 6 horas, sem se observar consumo total do substrato, não tendo sido realizada extração.XVIII.
A reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, utilizando o H2O2 (30% V/V) em vez de NaClO2 decorreu durante 30 horas, sem se observar consumo total do substrato. Após extração e isolamento efetuado de forma similar à reação 3.3.1.I, obteve-se um produto em óleo; 0,0674 (η=87%).XIX.
A reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, utilizando o H2O2 (30% V/V) em vez de NaClO2, e com adição de 7μL de solução de oxidante a cada 15 minutos durante 2 horas, decorreu durante 30 horas, sem se observar consumo total do substrato, não tendo sido realizada extração, não tendo sido realizada extração.XX.
A reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, utilizando alternativamente 1,4mmol H2O2 (30% V/V) em vez de NaClO2, decorreu durante 30 horas, sem se observar consumo total do substrato, não tendo sido realizada extração.XXI.
A reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.XX, mas utilizando 1mmol NHPI e fazendo adição gradual do oxidante durante 2 horas, decorreu durante 30 horas, sem se observar consumo total do substrato, não tendo sido realizada extração.XXII
. A reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, mas utilizando o formaldeído em vez de NHPI decorreu durante 30 horas, observando-se o consumo praticamente total do substrato. Após extração e isolamento efetuado de forma similar à reação 3.3.1.I, obteve-se um produto em óleo; 0,0638g (η=74%).XXIII.
A reação realizada em condições semelhantes à 3.3.1.IX, com 1mmol de substrato, NaClO2 (2,25mmol), NHPI (2,25mmol) e o catalisador VO(acac)2 (0,05mmol), decorreu durante 3 horas. Após extração e isolamento efetuado de forma similar à reação 3.3.1.I, obteve-se um produto na forma de óleo esbranquiçado, 0,305g (η=84%). Esse óleo foi dissolvido em 2ml de acetato de etilo e foi realizada uma coluna cromatográfica com sílica-gel, com um eluente de acetato de etilo:éter de petróleo 40-60oC (1:5), obtendo-se um produto sólido branco; 0,1480g (η=41%) [9].3.3.2
Oxidação alílica do acetado de pregnenolona com NaClO2, NHPI e
o catalisador VO(acac)2
Num balão de fundo redondo de 50mL dissolveu-se acetato de pregnenolona (0,25mmol) em acetonitrilo:água (2:1; 3mL). À solução previamente estabilizada à temperatura de 50ºC adicionou-se lentamente NaClO2 (sólido, 80%) (0,5625mmol), NHPI (0,05mmol) e o catalisador VO(acac)2 (0,125mmol). A reação decorreu, com agitação magnética e à temperatura de 50ºC, durante 15 minutos, tendo sido o controlo da reação realizado por CCF com eluente éter etílico:éter de petróleo 40-60oC (1:1).
A reação foi parada e a mistura reacional foi colocada em contacto com uma solução saturada de sulfito de sódio (40 ml) durante algumas horas. De seguida, fez-se extração com acetato de etilo (3x 40mL) e a fase orgânica foi sucessivamente lavada com uma solução saturada de bicarbonato de sódio (20mL) e água destilada (20mL), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e evaporada até à secura, obtendo-se um produto oleoso após secagem na estufa a vácuo, 0,0760g (η=84%) [9].
1H (CDCl
3, 400 MHz) δ 0,58 (s, 3H, 18-H3), 1,15 (s, 3H, 19-H3), 1,98 (s, 3H, 21-H3), 4,65 (m,1H, 3α-H), 5,64 (s, 1H, 6H)
3.3.3
Oxidação alílica do acetado de colesterilo com NaClO2, NHPI e o
catalisador VO(acac)2
Num balão de fundo redondo de 50mL dissolveu-se acetato de colesterilo (0,25mmol) em acetonitrilo:água (2:1; 3mL). À solução previamente estabilizada à temperatura de 50ºC adicionou-se lentamente NaClO (sólido, 80%) (0,5625mmol), NHPI (0,05mmol) e o catalisador
3.3.4
Oxidação alílica da desidroepiandrosterona com BiCl3 e TBHP
Num balão de fundo redondo de 50mL dissolveu-se DHEA (0,5mmol) em acetonitrilo (3mL). À solução previamente estabilizada à temperatura a 70ºC adicionou-se TBHP em solução 5,0-6,0M de n-decano (5mmol) e o catalisador BiCl3 (0,05mmol). A reação decorreu, com agitação magnética e à temperatura de 70ºC, durante aproximadamente 1 dia e 6 horas, sendo o controlo feito por CCF com eluente de éter etílico:éter de petróleo 40-60oC (2:1).
A reação foi parada e a mistura reacional foi colocada em contacto com uma solução saturada de sulfito de sódio (40 ml) durante algumas horas. De seguida, fez-se extração com acetato de etilo (3x 40mL) e a fase orgânica foi sucessivamente lavada com uma solução saturada de bicarbonato de sódio (20mL) e água destilada (20mL), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e evaporada à secura, obtendo-se o produto, em óleo branco 0,0546g (η=36%).
Após seco na estufa a vácuo, o produto foi diluído em éter etílico (2ml) e separado numa coluna cromatográfica de sílica-gel, com um eluente de éter etílico:éter de petróleo 40-60oC (1:5). Após separação, o solvente foi evaporado e o produto foi seco na estufa a vácuo, obtendo-se um produto sólido branco 0,0271 g (η=18%) [36].
1H (CDCl3, 400 MHz) δ 0,83 (s, 3H, 18-H3), 1,16 (s, 3H, 19-H3), 3,63 (m,1H, 3α-H), 5,68 (s, 1H, 6H)
3.3.5
Oxidação alílica do acetato de pregnenolona com BiCl3 e TBHP
Num balão de fundo redondo de 50mL dissolveu-se o acetato de pregnenolona (0,5mmol) em acetonitrilo (3mL). À solução previamente estabilizada à temperatura a 70ºC adicionou-se TBHP em solução 5,0-6,0M de n-decano (5mmol) e o catalisador BiCl3 (0,05mmol). A reação decorreu, com agitação magnética e à temperatura de 70ºC, durante 1 dia e 6 horas, sendo o controlo da reação realizado por CCF com eluente de éter etílico:éter de petróleo 40-60oC (2:1).
A reação foi parada e a mistura reacional foi colocada em contacto com uma solução saturada de sulfito de sódio (40ml) durante algumas horas. De seguida, fez-se extração com acetato de etilo (3x 40mL) e a fase orgânica foi sucessivamente lavada com uma solução saturada de bicarbonato de sódio (20mL) e água destilada (20mL), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e evaporada à secura, obtendo-se um produto sólido branco 0,0584g (η=35%).
Após seco na estufa a vácuo, o produto foi diluído em éter etílico (2 ml) e separado numa coluna cromatográfica de sílica-gel, com um eluente de éter etílico:éter de petróleo 40-60oC (1:5). No final, o solvente foi evaporado e o produto foi seco na estufa a vácuo, obtendo-se um produto sólido branco 0,0745g (η=48%) [65].
1H (CDCl
3, 400 MHz) δ 0,59 (s, 3H, 18-H3), 1,15 (s, 3H, 19-H3), 1,99 (s, 3H, 21-H3), 2,07 (s, 3H, CH3CO), 4,65 (m,1H, 3α-H), 5,65 (s, 1H, 6H)
3.3.6
Oxidação alílica da diosgenina com BiCl3 e TBHP
Num balão de fundo redondo de 50mL dissolveu-se a diosgenina (0,5mmol) em acetonitrilo (3 mL). À solução previamente estabilizada à temperatura a 70ºC adicionou-se TBHP em solução
5,0-6,0M de n-decano (5mmol) e o catalisador BiCl3 (0,05mmol). A reação decorreu, com agitação magnética e à temperatura de 70ºC, durante 1 dia e 6 horas, sendo o controlo da reação realizado por CCF com eluente de éter etílico:éter de petróleo 40-60oC (2:1).
A reação foi parada e a mistura reacional foi colocada em contacto com uma solução saturada de sulfito de sódio (40ml) durante algumas horas. De seguida, fez-se extração com acetato de etilo (3x 40mL) e a fase orgânica foi sucessivamente lavada com uma solução saturada de bicarbonato de sódio (20mL) e água destilada (20mL), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e evaporada à secura, obtendo-se um produto sólido branco 0,0633g (η=39%) [65].
Após seco na estufa a vácuo, o produto foi diluído em éter etílico (2 ml) e tentou-se purificar numa coluna cromatográfica de sílica-gel, com um eluente de éter etílico:éter de petróleo 40- 60oC (1:5), não tendo sido possível extrair o produto no final da coluna.
3.3.7
Oxidação alílica do acetato de diosgenina com TBAC, CuBr e TBHP
Num balão de fundo redondo de 50mL adicionou-se acetato de diosgenina (0,5mmol) brometo de cobre (0,34mmol), TBAC (0,6mmol), que foram dissolvidos em diclorometano (2,5mL). O TBHP (70% em H2O) foi adicionado em 3 partes às 0, 1,5 e 3 horas, numa quantidade de 0,32mL. A reação foi realizada à temperatura ambiente e decorreu durante 4 horas, sendo o controlo da reação realizado por CCF com eluente de éter etílico/éter de petróleo 40-60oC (1:2). A reação foi parada e a mistura reacional foi colocada em contacto com uma solução saturada de sulfito de sódio (500 ml) durante várias horas. De seguida, fez-se extração com diclorometano (2x 60mL) e a fase orgânica foi sucessivamente lavada com HCl 10%, solução saturada de bicarbonato de sódio (20mL) e água destilada (20mL), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e evaporada à secura, obtendo-se um produto sólido amarelado (0,0349 g). Após seco na estufa a vácuo, o produto foi dissolvido em éter etílico e separado numa coluna cromatográfica de sílica-gel com um eluente de éter etílico:éter de petróleo 40-60oC (1:9), obtendo-se um produto sólido branco, 0,0335 g (η=14%). A reação foi realizada tendo em conta a referência 45.