Tverrsnittskapasitet

Uma ve z q ue nã o ho uve d ife re nç a e ntre o s g rup o s d e a nima is c a stra d o s q ue re c e b e ra m p ilo c a rp ina 4%, q ua tro d ia s a p ó s o p ro c e d ime nto c irúrg ic o e fo ra m tra ta d o s c o m o ve íc ulo d e d iluiç ã o d o ho rmô nio (C X+C RO N+VEIC ) e o s a nima is c a stra d o s q ue re c e b e ra m p ilo c a rp ina 4%, q ua tro d ia s a p ó s o p ro c e d ime nto c irúrg ic o (C X+C RO N), e m to d o s o s e nsa io s e fe tua d o s, e le s se rã o , a p a rtir d e a g o ra , c o nsid e ra d o s C X+C RO N.

4.1 - C O NFIRMAÇ ÃO DE ATRO FIA G ENITAL APÓ S A C ASTRAÇ ÃO

A c o nfirma ç ã o d o q ua d ro a tró fic o fo i re a liza d a e m 50 a nima is (10 a nima is d o g rup o C X, 10 a nima is d o g rup o C X+C RO N, 10 a nima is d o g rup o C X+C RO N+AMP, 10 a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2 e 10 a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2+AMP) a tra vé s d e c ito lo g ia va g ina l, o nd e fo i ve rific a d a a inte rrup ç ã o d o c ic lo e stra l. To d o s o s a nima is q ue p a ssa ra m p e la inte rve nç ã o c irúrg ic a tive ra m a sua c a stra ç ã o c o nfirma d a .

Na a ná lise d a s lâ mina s fo i o b se rva d o um p a d rã o d e c é lula s id ê ntic o a o p e río d o d ie stro d o c ic lo e stra l, isto é , p re se nç a q ua se q ue e xc lusiva d e le uc ó c ito s no d uc to va g ina l, o q ue c o nfirma a d iminuiç ã o d o s níve is d e e stro g ê nio .

4.2 - ANÁLISE C O MPO RTAMENTAL APÓ S ADMINISTRAÇ ÃO DE PILO C ARPINA

Ap ó s a a d ministra ç ã o d a p ilo c a rp ina , o s a nima is a p re se nta m a uto mo tismo s fa c ia is, a c ine sia e tre mo re s. Minuto s a p ó s, e ste c o mp o rta me nto p ro g re d iu p a ra c rise s mo to ra s límb ic a s, o nd e o s a nima is a p re se nta va m sa liva ç ã o inte nsa , c o m c lo nia s d e p a ta s d ia nte ira s, a p o ia d o s so b re a s p a ta s tra se ira s e c o nse q üe nte q ue d a . Essa s c rise s mo to ra s límb ic a s c o me ç a va m a lg uns minuto s a p ó s a inje ç ã o d a p ilo c a rp ina (0,8 ± 0,5 min na s fê me a s c a stra d a s q ue re c e b e ra m p ilo c a rp ina e 42,7 ± 14,4 min na s fê me a s q ue re c e b e ra m p ilo c a rp ina ) e fo ra m re c o rre nte s, c ulmina nd o e m sta tus e p ile p tic us (e m 31,8 ± 15,5 min

na s fê me a s c a stra d a s q ue re c e b e ra m p ilo c a rp ina e 48,8 ± 18,4 min na s fê me a s q ue re c e b e ra m p ilo c a rp ina ,) q ue d ura va e m mé d ia 12 ho ra s. Este p e río d o é d e no mina d o fa se a g ud a d o mo d e lo .

Ap ó s o p e río d o a g ud o , o s a nima is nã o re sp o nd e m a o s e stímulo s a mb ie nta is, re to ma nd o g ra d a tiva me nte a o se u c o mp o rta me nto no rma l, c o me ç a nd o ne ste e stá g io a um p e río d o livre d e c rise s q ue te m sid o c a ra c te riza d o p e la no rma liza ç ã o d a s a lte ra ç õ e s c o mp o rta me nta is e e le tro g rá fic a s, o q ue c o nfig ura o p e río d o sile nc io so d o mo d e lo . Este p e río d o te ve a d ura ç ã o d e 10,1 ± 4,4 d ia s na s fê me a s q ue fo ra m c a stra d a s e re c e b e ra m a p e na s p ilo c a rp ina e 49,7 ± 12,9 d ia s na s fê me a s q ue a p e na s re c e b e ra m p ilo c a rp ina , c o nfirma nd o o s d a d o s p re via me nte d e sc rito s p e lo no sso g rup o (VALENTE e c o ls., 2002).

To d o s o s a nima is so b re vive nte s a e ste s d o is p e río d o s p a ssa ra m a e xib ir c rise s e sp o ntâ ne a s e re c o rre nte s, a s q ua is c a ra c te riza m o p e río d o c rô nic o d o mo d e lo .

O s a nima is d o s g rup o s c o ntro le , q ue re c e b e ra m so luç ã o sa lina e m ve z d e p ilo c a rp ina , nã o a p re se nta ra m ne nhuma a lte ra ç ã o c o mp o rta me nta l, me smo a p ó s a re mo ç ã o d o s o vá rio s no g rup o d e a nima is c a stra d o s.

4.3 - FREQ ÜÊNC IA DE C RISES

A a ná lise d a fre q üê nc ia d e c rise s fo i o b se rva d a no s a nima is q ue re c e b e ra m p ilo c a rp ina a p a rtir d a p rime ira c rise e sp o ntâ ne a (e sta b e le c ime nto d o p e río d o c rô nic o d o mo d e lo ), p o r um p e río d o d e 60 d ia s e m o b se rva ç õ e s d iá ria s p o r um siste ma d e mo nito ra ç ã o 24 h/ d ia . A p rime ira fa se c o nsistiu e m o b se rva r a s c rise s p o r um p e río d o d e 30 d ia s. Ap ó s e sta fa se d e o b se rva ç ã o o s a nima is c a stra d o s e c rô nic o s (C X+C RO N) fo ra m d ivid id o s e m q ua tro g rup o s e o b se rva d o s p o r ma is 30 d ia s, se nd o q ue um d e ste s g rup o s fo i c o nsid e ra d o c o mo c o ntro le d o tra ta me nto , uma ve z q ue re c e b e u so me nte a so luç ã o d e d iluiç ã o d o ho rmô nio . O s o utro s trê s g rup o s fo ra m utiliza d o s p a ra o e stud o d o tra ta me nto c o m a re p o siç ã o ho rmo na l, se nd o e ntã o d ivid id o s e m C X+C RO N+AMP, C X+C RO N+E2 e C X+C RO N+E2+AMP. Pa ra o s a nima is q ue re c e b e ra m tra ta me nto , a p rime ira fa se d a o b se rva ç ã o d a fre q üê nc ia d e c rise s fo i utiliza d a c o mo c o ntro le d a fa se p o ste rio r. Fo i fe ita o b se rva ç ã o d o s a nima is a p e na s c rô nic o s (C RO N), q ue fo ra m c o mp a ra d o s a o s c a stra d o s e c rô nic o s (C X+C RO N), p a ra ve rific a rmo s se a c a stra ç ã o p o d e ria inte rfe rir na fre q üê nc ia d e c rise s d o s a nima is.

O s re sulta d o s o b tid o s sã o a q ui a p re se nta d o s c o mo a mé d ia se ma na l ± d e svio p a d rã o d a fre q üê nc ia d e c rise s d ura nte o p e río d o d e o b se rva ç ã o .

Pud e mo s o b se rva r q ue nã o e xiste d ife re nç a e sta tístic a sig nific a nte q ua nd o c o mp a ra mo s a fre q üê nc ia d e c rise s e ntre o s a nima is C RO N (6,4

± 3,7 c rise s/ se ma na ) e C X+C RO N (6,6 ± 3,9 c rise s/ se ma na ), mo stra nd o q ue so me nte a c a stra ç ã o nã o mo d ific a o p a d rã o d e c rise s na fa se c rô nic a d e ste mo d e lo .

Q ua nd o c o mp a ra mo s a fre q üê nc ia d e c rise s e ntre o s a nima is q ue re c e b e ra m re p o siç ã o ho rmo na l d e a c e ta to d e me d ro xip ro g e ste ro na , a nte s e d ura nte o tra ta me nto , p ud e mo s ve rific a r q ue e xiste uma d ife re nç a e sta tístic a sig nific a nte e ntre a nte s (6,5 ± 2,7c rise s/ se ma na ) e d ura nte (5 ± 2,8 c rise s/ se ma na ; *p <0,05) o tra ta me nto . Ho uve , p o rta nto , uma re d uç ã o d o núme ro d e c rise s ne sse s a nima is, ind uzid a p e lo a c e ta to d e me d ro xip ro g e ste ro na .

C o m re la ç ã o a fre q üê nc ia d e c rise s e ntre o s a nima is q ue re c e b e ra m re p o siç ã o ho rmo na l d e 17β-e stra d io l, a nte s e d ura nte o tra ta me nto , p ud e mo s ve rific a r q ue nã o e xiste d ife re nç a e sta tístic a sig nific a nte q ua nd o c o mp a ra d o s a nte s (6,7 ± 3,4 c rise s/ se ma na ) e d ura nte (7 ± 3,2 c rise s/ se ma na ) o tra ta me nto . Esse s d a d o s mo stra m, p o rta nto , q ue o 17β - e stra d io l nã o mo d ific o u o p a d rã o d e c rise s na fa se c rô nic a .

No s a nima is q ue re c e b e ra m re p o siç ã o ho rmo na l d e 17β-e stra d io l + a c e ta to d e me d ro xip ro g e ste ro na , a nte s e d ura nte o tra ta me nto , p ud e mo s ve rific a r q ue e xiste uma d ife re nç a e sta tístic a sig nific a nte q ua nd o c o mp a ra d o s a nte s (6,1 ± 2,9 c rise s/ se ma na ) e d ura nte (3,9 ± 2,1 c rise s/ se ma na ; **p <0,0004) o tra ta me nto , mo stra nd o q ue a a sso c ia ç ã o e ntre o s d o is ho rmô nio s é c a p a z d e re d uzir b a sta nte o núme ro d e c rise s ne sse s a nima is (FIG URA 5).

4.4 - ANÁLISE DA C O LO RAÇ ÃO DE NEO - TIMM

A c o lo ra ç ã o d e ne o -Timm na s se c ç õ e s c e re b ra is, no g iro d e nta d o , fo i a va lia d a usa nd o -se a e sc a la d e c la ssific a ç ã o utiliza d a p o r Ho lme s e c o ls. (1999), o nd e fo i fe ita uma a ná lise sub je tiva a p lic a nd o -se a e sc a la d e 0-V, c o mo d e sc rita a nte rio rme nte . A c la ssific a ç ã o fo i fe ita a tra vé s d a a va lia ç ã o d o b ro ta me nto d a s fib ra s musg o sa s sup ra g ra nula re s, q ue fo i e fe tua d a p o r c inc o o b se rva d o re s d ife re nte s q ue nã o sa b ia m a q ue g rup o a s lâ mina s p e rte nc ia m. O s re sulta d o s o b tid o s re p re se nta m a mé d ia d a s o b se rva ç õ e s e fe tua d a s.

FIG URA 5 - G rá fic o re p re se nta nd o a mé d ia d a fre q üê nc ia se ma na l d e c rise s no s a nima is q ue re c e b e ra m p ilo c a rp ina . (A) re p re se nta a fre q üê nc ia

d e c rise s a nte s d a re p o siç ã o ho rmo na l e (D) re p re se nta a fre q üê nc ia d e c rise s d ura nte a re p o siç ã o ho rmo na l. Sig nific â nc ia e sta tístic a : *p <0,05, **p <0,0004 (te ste “ t” d e Stud e nt).

Ap re se nta ra m g ra u 0, to d o s o s a nima is d o g rup o c o ntro le , isto é , o s g rup o s E, M, D, P e C X, o nd e se ve rific o u a a usê nc ia d e g râ nulo s na re g iã o sup ra g ra nula r.

Fo ra m c la ssific a d o s c o mo te nd o g ra u III o s a nima is d o s g rup o s C RO N, C X+C RO N+AMP e C X+C RO N+E2+AMP, e nq ua nto q ue o g rup o C X+C RO N+E2, fo i c la ssific a d o c o mo te nd o g ra u IV.

O s a nima is c a stra d o s e c rô nic o s, se m re p o siç ã o ho rmo na l (C X+C RO N) a p re se nta ra m o ma io r g ra u d e b ro ta me nto sup ra g ra nula r d e fib ra s musg o sa s (g ra u V).

C o m e ste s re sulta d o s p ud e mo s ve rific a r q ue o s a nima is c a stra d o s e c rô nic o s a p re se nta m um inte nso b ro ta me nto d e fib ra s musg o sa s, ma io r q ue o o b se rva d o no s a nima is a p e na s c rô nic o s (g ra u V x III), mo stra nd o q ue a c a stra ç ã o a ume nta o b ro ta me nto d e fib ra s musg o sa s.

Já o s a nima is tra ta d o s c o m 17β-e stra d io l a p re se nta m um b ro ta me nto me no r q ue o g rup o c a stra d o , se m re p o siç ã o ho rmo na l (g ra u IV x V). Aq ue le s a nima is tra ta d o s c o m a c e ta to d e me d ro xip ro g e ste ro na e c o m 17β-e stra d io l + me d ro xip ro g e ste ro na a p re se nta m um b ro ta me nto a ind a me no r q ue o s a nima is c a stra d o s (g ra u III x V), simila r a o p a d rã o o b se rva d o no s a nima is c rô nic o s nã o c a stra d o s (g ra u III x III). Ne ste c a so , o tra ta me nto c o m a re p o siç ã o d e a c e ta to d e me d ro xip ro g e ste ro na e d e 17β-e stra d io l + me d ro xip ro g e ste ro na p a re c e te r inte rro mp id o o d e se nvo lvime nto d o b ro ta me nto sup ra g ra nula r no níve l III, va lo r simila r a o ve rific a d o no s a nima is c rô nic o s nã o c a stra d o s (FIG URAS 6 e 7 e TABELA 3) .

4.5 - ANÁLISE DA C O LO RAÇ ÃO DE NISSL

O s c o rte s histo ló g ic o s sub me tid o s à c o lo ra ç ã o d e Nissl mo stra m q ue o s a nima is d o s g rup o s c o ntro le s (E, M, D, P e C X) ma ntive ra m p re se rva d a s a s c a ra c te rístic a s mo rfo ló g ic a s d o hip o c a mp o , se m a lte ra ç õ e s e p e rd a c e lula r sig nific a nte s.

O s a nima is d o s g rup o s e xp e rime nta is a p re se nta ra m uma visíve l p e rd a c e lula r e a lte ra ç ã o d a mo rfo lo g ia d o hip o c a mp o , se nd o q ue p a ra

TABELA 3 - Aná lise d a c o lo ra ç ã o d e ne o -Timm a tra vé s d a e sc a la sub je tiva p ro p o sta p o r Ho lme s e c o ls. (1999).

o g rup o C RO N, no to u-se uma d e se strutura ç ã o c e lula r e m C A3, e visíve l d isp e rsã o d a s c é lula s no hilo d o g iro d e nta d o .

No hip o c a mp o d o s a nima is C X+C RO N, p o d e -se no ta r q ue ta nto C A1, q ua nto C A3 e o g iro d e nta d o a p re se nta m d e se strutura ç ã o d a c ito a q uite tura e q ue ha via d isp e rsã o c e lula r e m C A3 e hilo .

No s a nima is C X+C RO N+AMP, a re g iã o d o g iro d e nta d o e C A3 a p a re c e ra m a lte ra d a s mo rfo lo g ic a me nte , c o m visíve l d isp e rsã o c e lula r, a ssim c o mo no hilo d o g iro d e nta d o .

Entre ta nto , a c ito a rq uite tura d o hip o c a mp o p a re c e u ma is p re se rva d a no s a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2, p o ré m p o d e -se o b se rva r q ue o g iro d e nta d o a p re se nta -se a lte ra d o mo rfo lo g ic a me nte , c o m uma visíve l d isp e rsã o c e lula r, a ssim c o mo na re g iã o d o hilo . No s a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2+AMP, o hip o c a mp o ma nte ve sua mo rfo lo g ia b á sic a . No e nta nto , fo i visíve l a d isp e rsã o c e lula r e m C A3 e no hilo d o g iro d e nta d o , a ssim c o mo a lte ra ç ã o na mo rfo lo g ia d o g iro d e nta d o (FIG URAS 8 e 9).

4.5.1 - Q UANTIFIC AÇ ÃO C ELULAR PELA TÉC NIC A DE NISSL

O s c o rte s histo ló g ic o s d o s c é re b ro s d o s a nima is d o s g rup o s c o ntro le (E, M, D, P e C X), a ssim c o mo d o s g rup o s e xp e rime nta is (C RO N, C X+C RO N, C X+C RO N+AMP, C X+C RO N+E2 e C X+C RO N+E2+AMP) fo ra m a na lisa d o s e m mic ro sc o p ia ó p tic a e a s c é lula s d a s re g iõ e s C A1 e C A3 fo ra m q ua ntific a d a s, se g uind o a s d e sc riç õ e s fe ita s e m mé to d o s.

Fo i utiliza d o c o mo c o ntro le a q ua ntific a ç ã o d a s c é lula s d a s re g iõ e s C A1 e C A3 d o s a nima is d o g rup o e stro (E) o nd e fo i e nc o ntra d o 103,3 ±

8,3 c é lula s/ re g iã o e m C A1 e 74,7 ± 10,4 c é lula s/ re g iã o e m C A3, o q ue fo i c o nsid e ra d o c o mo 100% d e c e lula rid a d e .

Na re g iã o C A1 p ud e mo s ve rific a r q ue há uma c o nsid e rá ve l p e rd a ne uro na l no s a nima is d o s g rup o s e xp e rime nta is C RO N (88,5 ± 8,1 c é lula s/ re g iã o , **p <0,001) e C X+C RO N (89,8 ± 7,6 c é lula s/ re g iã o , **p <0,001), o q ue e q uiva le a 85,7% e 86,9% re sp e c tiva me nte , q ua nd o c o mp a ra d o a o g rup o c o ntro le .

Já no s a nima is q ue re c e b e ra m o s tra ta me nto s, p ud e mo s ve rific a r q ue a p e rd a ne uro na l fo i me no s inte nsa , uma ve z q ue p a ra o s a nima is d o g rup o C X+C RO N+AMP a d e nsid a d e c e lula r e nc o ntra d a fo i d e 98,5 ± 3,5 c é lula s/ re g iã o , p >0,05 (95,4%), p a ra o s a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2 fo i d e 96,3 ± 8,7 c é lula s/ re g iã o , **p <0,001 (93,2%) e p a ra o s a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2+AMP fo i d e 98,9 ± 4,6 c é lula s/ re g iã o , p >0,05 (95,8%) (FIG URA 10 - pa ine l A).

Na re g iã o C A3, p ud e mo s ve rific a r q ue no s a nima is d o s g rup o s e xp e rime nta is C RO N um núme ro d e c é lula s d e 41,2 ± 8,2 c é lula s/ re g iã o , **p <0,001 e p a ra o g rup o C X+C RO N 41,3 ± 5,7 c é lula s/ re g iã o , **p <0,001, o q ue e q uiva le a 54,1% e 54,3% re sp e c tiva me nte , q ua nd o c o mp a ra d o s c o m o c o ntro le .

No s g rup o s q ue re c e b e ra m o s tra ta me nto s ho rmo na is, p ud e mo s ve rific a r q ue a p e rd a ne uro na l fo i me no s inte nsa , uma ve z q ue p a ra o s a nima is d o g rup o C X+C RO N+AMP a d e nsid a d e c e lula r e nc o ntra d a fo i d e 61,3 ± 10,1 c é lula s/ re g iã o , **p <0,001 (80,5%), p a ra o s a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2 fo i d e 57,6 ± 14,2 c é lula s/ re g iã o , **p <0,001 (75,7%) e p a ra o s a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2+AMP fo i d e 65,8 ± 13,6 c é lula s/ re g iã o , *p <0,01 (86,6%) (FIG URA 10 - pa ine l B).

4.6 - ANÁLISE DA IMUNO HISTO Q UÍMIC A PARA PARVALBUMINA

O s c o rte s histo ló g ic o s sub me tid o s a imuno histo q uímic a mo stra m q ue o s a nima is d o s g rup o s c o ntro le (E, M, D e C X) a p re se nta m p o uc a imuno ma rc a ç ã o p a ra p a rva lb umina . Ho uve , e ntre ta nto , uma ma io r imuno rre a tivid a d e p a ra p a rva lb umina no s a nima is d o g rup o (P). Ho uve flutua ç õ e s na imuno rre a tivid a d e c o ntra a p a rva lb umina na s d ife re nte s re g iõ e s d a fo rma ç ã o hip o c a mp a l, mo stra nd o uma c ic lic id a d e na e xp re ssã o d e sta p ro te ína na s d ife re nte s fa se s d o c ic lo e stra l (FIG URA 11 - pa iné is A, B,C ,D e E).

FIG URA 10 - De nsid a d e c e lula r e m C A1 (A) e C A3 (B) e m c o rte s c o ra d o s p e la té c nic a d e Nissl. O g rup o sa lina e stro (E) re p re se nta 100% d o núme ro d e c é lula s. Sig nific â nc ia e sta tístic a : *p <0,01 e **p <0,001 (ANO VA c o m p ó s te ste Tuke y`s Multip le C o mp a riso n).

Já no s a nima is d o s g rup o s e xp e rime nta is (C RO N, C X+C RO N, C X+C RO N+AMP, C X+C RO N+E2 e C X+C RO N+E2+AMP) p o d e -se no ta r um a ume nto c o nsid e rá ve l na imuno ma rc a ç ã o , ta nto p a ra fib ra s q ua nto p a ra c é lula s e e ste a ume nto p a re c e se r a lte ra d o p e lo tra ta me nto a o s q ua is o s a nima is fo ra m sub me tid o s (FIG URA 11 - pa iné is F,G ,H,I e J).

C o m re la ç ã o à s c é lula s, fo i p o ssíve l ve rific a r q ue no s a nima is d o g rup o C RO N, na re g iã o C A1 ho uve p o uc a imuno ma rc a ç ã o (FIG URA 12), e nq ua nto q ue no hilo , fo i p o ssíve l ve rific a r ma io r imuno ma rc a ç ã o (FIG URA 14), q ua nd o c o mp a ra d o s c o m o s a nima is d o g rup o c o ntro le e stro (E). Pa ra o s a nima is d o g rup o C X+C RO N, ho uve p o uc a imuno ma rc a ç ã o na re g iã o C A1(FIG URA 12), c o m ma io r inte nsid a d e e m C A3 (FIG URA 13) e inte nsa ma rc a ç ã o no hilo , e m re la ç ã o a o s a nima is d o g rup o c o ntro le e stro (E) (FIG URA 14).

No s a nima is d o g rup o C X+C RO N+AMP fo i p o ssíve l ve rific a r ma io r imuno ma rc a ç ã o na re g iã o d o g iro d e nta d o , c o m inte nsa imuno ma rc a ç ã o na s re g iõ e s C A3 e hilo , q ua nd o c o mp a ra d o s a o s a nima is d o g rup o c o ntro le e stro (E). Já no s a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2 ho uve ma io r imuno ma rc a ç ã o na s re g iõ e s C A3 e hilo , e nq ua nto q ue no s a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2+AMP ho uve ma io r imuno ma rc a ç ã o na s re g iõ e s C A1, C A3 e g iro d e nta d o e inte nsa ma rc a ç ã o na re g iã o d o hilo , q ua nd o c o mp a ra d o s a o s a nima is d o g rup o c o ntro le (E).

Em re la ç ã o à s fib ra s imuno ma rc a d a s p a ra p a rva lb umina , ho uve ma io r imuno ma rc a ç ã o na re g iã o C A1 no s a nima is d o s g rup o s C RO N, C X+C RO N e C X+C RO N+AMP, e inte nsa imuno ma rc a ç ã o no s a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2+AMP, q ua nd o c o mp a ra d o s a o g rup o c o ntro le e stro (E). Na re g iã o C A3, fo i p o ssíve l ve rific a r a ume nto na imuno ma rc a ç ã o no s

a nima is d o s g rup o s C X+C RO N+AMP e C X+C RO N+E2+AMP, e m re la ç ã o a o s a nima is d o g rup o c o ntro le e stro (E).

Já na re g iã o d o hilo , ho uve ma io r imuno ma rc a ç ã o no s a nima is d o s g rup o s C X+C RO N e C X+C RO N+E2 e inte nsa imuno ma rc a ç ã o no s a nima is d o s g rup o s C RO N, C X+C RO N+AMP e C X+C RO N+E2+AMP, q ua nd o c o mp a ra d o s a o s a nima is d o g rup o c o ntro le e stro (E).

4.6.1- Q UANTIFIC AÇ ÃO DAS C ÉLULAS MARC ADAS C O M PARVALBUMINA

O s c o rte s histo ló g ic o s d o s c é re b ro s d o s a nima is d o s g rup o s c o ntro le (E, M, D, P e C X), a ssim c o mo d o s g rup o s e xp e rime nta is (C RO N, C X+C RO N, C X+C RO N+AMP, C X+C RO N+E2 e C X+C RO N+E2+AMP) fo ra m a na lisa d o s e m mic ro sc o p ia ó p tic a e a s c é lula s d a s c a ma d a s mo le c ula r e g ra nula r d o g iro d e nta d o , a ssim c o mo d o hilo fo ra m q ua ntific a d a s se g uind o a s d e sc riç õ e s fe ita s a nte rio rme nte .

Fo i fe ita a ná lise sub je tiva d a imuno ma rc a ç ã o p a ra p a rva lb umina na s c é lula s d a s re g iõ e s C A1, C A3, g iro d e nta d o e hilo , a ssim c o mo d a s fib ra s e m C A1(stra tum ra dia tum), C A3 (stra tum ra dia tum) e hilo e m to d o s

TABELA 4 - Re p re se nta ç ã o d a imuno ma rc a ç ã o d a s c é lula s c o ra d a s p e la

p a rva lb umina . Le g e nd a : (-) a usê nc ia d e ma rc a ç ã o , (+) p o uc a ma rc a ç ã o , (++) muita ma rc a ç ã o e (+++) inte nsa ma rc a ç ã o .

TABELA 5 - Re p re se nta ç ã o d a imuno ma rc a ç ã o d a s fib ra s c o ra d a s p e la p a rva lb umina . Le g e nd a : (-) a usê nc ia d e ma rc a ç ã o , (+) p o uc a

Em se g uid a fo i fe ita a ná lise c o mp a ra tiva d a imuno ma rc a ç ã o d a s c é lula s e fib ra s imuno ma rc a d a s c o m re la ç ã o a o g rup o c o ntro le e stro (TABELA 6 e 7).

TABELA 6 - Aná lise c o mp a ra tiva d a imuno ma rc a ç ã o d a s c é lula s c o ra d a s p e la p a rva lb umina no s a nima is d o s g rup o s e xp e rime nta is c o m re la ç ã o a o s a nima is d o g rup o c o ntro le e stro (E).

4.6.1.1 - Q UANTIFIC AÇ ÃO C ELULAR NA C AMADA MO LEC ULAR

Na c a ma d a mo le c ula r d o g iro d e nta d o p ud e mo s ve rific a r q ue a d e nsid a d e c e lula r so fre u flutua ç õ e s d ura nte a s fa se s d o c ic lo e stra l. O b se rva mo s q ue o s a nima is na fa se p ro e stro (P) a p re se nta m ma io r imuno ma rc a ç ã o (7,8 ± 1,5 c é lula s/ c a ma d a , **p <0,001), se nd o q ue e m e stro (E) a p re se nta m 2,7 ± 1,2 c é lula s/ c a ma d a , e m me ta e stro (M) a p re se nta m 1,8 ± 1,3 c é lula s/ c a ma d a (p >0,05) e a me no r imuno ma rc a ç ã o é ve rific a d a e m d ie stro (D) c o m 1 ± 0,6 c é lula s/ c a ma d a (p >0,05). No s a nima is c a stra d o s (C X) fo i ve rific a d a 4 ± 1,8 c é lula s/ c a ma d a (p >0,05).

TABELA 7 - Aná lise c o mp a ra tiva d a imuno ma rc a ç ã o d a s fib ra s c o ra d a s p e la p a rva lb umina no s a nima is d o s g rup o s e xp e rime nta is c o m re la ç ã o a o s a nima is d o g rup o c o ntro le e stro (E). Le g e nd a : (↓) d iminuiç ã o d a imuno ma rc a ç ã o , (=) imuno ma rc a ç ã o se me lha nte , (↑) a ume nto d a imuno ma rc a ç ã o e (↑↑) a ume nto inte nso d a imuno ma rc a ç ã o ;

O s a nima is d o s g rup o s e xp e rime nta is fo ra m c o mp a ra d o s c o m o s a nima is d o g rup o C X+C RO N. Pud e mo s ve rific a r no s a nima is d o s g rup o s e xp e rime nta is C RO N 3,8 ± 1,7 c é lula s/ c a ma d a (***p <0,001) e no s C X+C RO N uma d e nsid a d e d e 2,7 ± 1 c é lula s/ c a ma d a .

No s a nima is q ue re c e b e ra m o s tra ta me nto s, p ud e mo s ve rific a r q ue p a ra o s a nima is d o g rup o C X+C RO N+AMP a d e nsid a d e c e lula r e nc o ntra d a fo i d e 6,5 ± 1,2 c é lula s/ c a ma d a (***p <0,01), no s a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2+AMP fo i d e 5,4 ± 0,9 c é lula s/ c a ma d a (*p <0,05). No s a nima is d o g rup o C X+C RO N+E2 p ud e mo s ve rific a r uma me no r imuno ma rc a ç ã o (1,6 ± 0,9 c é lula s/ c a ma d a , p >0,05) (TABELA 8 e FIG URA 15).

TABELA 8 - De nsid a d e d e c é lula s imuno ma rc a d a s p e la p a rva lb umina na c a ma d a mo le c ula r d o g iro d e nta d o e ntre o s a nima is d o s g rup o s c o ntro le . Sig nific â nc ia e sta tístic a : NS p >0,05, *p <0,05 e **p <0,001 (ANO VA c o m p ó s te ste - Tuke y`s Multip le C o mp a riso n).

4.6.1.2 - Q UANTIFIC AÇ ÃO C ELULAR NA C AMADA G RANULAR

Na c a ma d a g ra nula r d o g iro d e nta d o p ud e mo s ve rific a r q ue a d e nsid a d e c e lula r ta mb é m so fre u flutua ç õ e s d ura nte o c ic lo e stra l. No s