Avansement og utdannelse blant de førkrigsansatte

A aplicação do tratamento foi realizada 48 horas após a semeadura para minimizar os efeitos provenientes da diferença individual das sementes, maximizando a visualização dos efeitos provocados pela inibição da CAT durante o estabelecimento pós-germinativo. A avaliação da morfologia externa das plântulas permitiu constatar os estágios de desenvolvimento. A protusão da radícula ocorreu 24 e 12 horas após a semeadura nas plântulas de girassol e cártamo, respectivamente (dados não mostrados). Enquanto isso, a abertura das folhas cotiledonares de ambas as espécies ocorreu 48 horas após a transferência (Figura 6). No momento da transferência, as plântulas de girassol apresentavam pouca ou nenhuma manifestação da coloração verde, por outro lado, nas plântulas de cártamo

foi observada a coloração verde no momento do tratamento, uma diferença de 6 horas de antecedência em comparação com o girassol.

Na Figura 6 observa-se que as plantas tratadas com o 3-AT apresentam inibição do crescimento radicular e baixa densidade de raízes laterais, melhor visualizado 24 horas após a transferência. Adicionalmente, foi observado um escurecimento na região de elongação das raízes nas plântulas tratadas com 48 horas. Entretanto, não foram visualizados danos ou diferenças na morfologia externa das folhas cotiledonares, quando comparadas as plantas controle. Além disso, nas plântulas de girassol o caule antecipa-se ao cotilédone no aparecimento da coloração verde, iniciando 6 horas após a transferência.

A análise do conteúdo de clorofilas totais evidenciou que há um ponto de inflexão entre os tempos de 24 e 48 horas em ambas as espécies (Figura 7). Durante o desenvolvimento das plântulas também foi observada uma diferença significativa no conteúdo de clorofilas das plântulas tratadas em 12 e 24 horas para o girassol e 24 horas para o cártamo. Porém, 48 horas após a transferência não foram constatadas diferenças entre a quantidade de clorofilas entre as plântulas tratadas e controle.

O conteúdo de proteínas solúveis totais diminui em função do tempo de desenvolvimento das plântulas de cártamo (Figura 8). Enquanto isto, as plântulas controle e tratadas de girassol apresentaram uma redução considerável deste conteúdo em 24 e 48 horas, respectivamente.

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Figura 6 – Figuras representativas das plântulas durante a realização dos experimentos. (A) Girassol; (B) Cártamo.

Figura 7 – Conteúdo de clorofilas na parte aérea das plântulas. (A) Girassol; (B) Cártamo. A análise estatística indica diferença significativa entre as plantas controle e tratadas com mesmo tempo de desenvolvimento. Legenda: (*) diferença significativa no intervalo de confiança de 95% (P < 0,05).

Figura 8 – Conteúdo de proteínas solúveis totais na parte aérea das plântulas. (A) Girassol; (B) Cártamo. Barras simbolizam o desvio padrão de amostral (s). A análise estatística indica diferença significativa entre as plantas controle e tratadas com mesmo tempo de desenvolvimento. Legenda: (**) diferença significativa no intervalo de confiança de 99% (P < 0,01); (*) diferença significativa no intervalo de confiança de 95% (P < 0,05).

A aplicação do inibidor 3-AT provocou um decréscimo significativo na atividade total da CAT 6 horas após a tranferência para o tratamento (Figura 9). As médias das atividades das plântulas tratadas permaneceram reduzidas durante todo o experimento, ainda assim, as plântulas de cártamo tratadas apresentam uma tendência ao aumento função do tempo de desenvolvimento. De forma similar, a atividade da CAT nas plantas de girassol tratadas com 3-AT praticamente dobra entre 24 e 48 horas, mas a média permanece com valores inferiores ao das plantas controle.

As plantas de girassol tratadas apresentaram decréscimo significativo na atividade total de APX nos tempos iniciais, porém observa-se uma recuperação progressiva a partir das 24 horas, que culmina em uma atividade similar a das plântulas controle em 48 horas (Figura 9). Por outro lado, a atividade da APX nas plântulas de cártamo aumenta significativamente após 12 horas de tratamento, apresentando o nível máximo de atividade em 48 horas.

A atividade total da SOD tende a aumentar com o tempo para ambas as espécies (Figura 10). As plântulas de girassol tratadas mantiveram a atividade total da SOD no mesmo nível (2 UA) até às 24 horas de tratamento, aumentando consideravelmente com 48 horas. A atividade da SOD nas plântulas tratadas de cártamo aumenta progressivamente e também atinge o nível máximo com 48 horas.

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Figura 9 – Atividade total da Catalase e da Ascorbato Peroxidase quantificadas durante a realização dos experimentos. (A) Atividade total da Catalase em plântulas de Girassol; (B) Atividade total da Catalase em plântulas de Cártamo; (C) Atividade total da Ascorbato Peroxidase em plântulas de Girassol; (D) Atividade total da Ascorbato Peroxidase em plântulas de Cártamo. Barras simbolizam o desvio padrão de amostral (s). A análise estatística indica diferença significativa entre as plantas controle e tratadas com mesmo tempo de desenvolvimento. Legenda: (**) diferença significativa no intervalo de confiança de 99% (P < 0,01); (*) diferença significativa no intervalo de confiança de 95% (P < 0,05); (#) diferença significativa no intervalo de confiança de 90% (P < 0,1).

Figura 10 – Atividade de Superóxido Dismutase. (A) Atividade total da Superóxido Dismutase em plântulas de Girassol; (B) Atividade total da Superóxido Dismutase em plântulas de Cártamo. Barras simbolizam o desvio padrão de amostral (s). A análise estatística indica diferença significativa entre as plantas controle e tratadas com mesmo tempo de desenvolvimento. Legenda: (**) diferença significativa no intervalo de confiança de 99% (P < 0,01); (*) diferença significativa no intervalo de confiança de 95% (P < 0,05).

A inibição da CAT provocou poucas alterações nos conteúdos de H2O2 e MDA,

mesmo tais parâmetros estando relacionados a danos oxidativos diretos e indiretos. Nas plântulas de girassol tratadas foi possível constatar um aumento significativo do conteúdo de H2O2 em 6 horas (Figura 11). De forma similar, o conteúdo de peróxido

de hidrogênio também aumentou nas plântulas de cártamo tratadas com 6 e 12 horas. Porém, observa-se uma redução dos níveis de H2O2 em 48 horas,

principalmente nas plântulas de cártamo tratadas. Por outro lado, nas plantulas tratadas de ambas as espécies, o conteúdo de MDA não variou em função do aumento do conteúdo de H2O2, apresentando um aumento em 24 e 48 horas para o

cártamo e o girassol, respectivamente. Verificou-se também um decréscimo do conteúdo de MDA nas plântulas de girassol tratadas com 24 horas.

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Figura 11 – Peroxidação de lipídeos e conteúdo de peróxido de hidrogênio. (A) Peroxidação de lipídeos em plântulas de girassol; (B) Conteúdo de peróxido de hidrogênio em plântulas de girassol; (C) Peroxidação de lipídeos em plântulas de cártamo; (D) Conteúdo de peróxido de hidrogênio em plântulas de cártamo. Barras simbolizam o desvio padrão de amostral (s). A análise estatística indica diferença significativa entre as plantas controle e tratadas com mesmo tempo de desenvolvimento. Legenda: (*) diferença significativa no intervalo de confiança de 95% (P < 0,05); (#) diferença significativa no intervalo de confiança de 90% (P < 0,1).

Verificou-se por meio de uma regressão linear múltipla o nível de correlação entre o aumento do conteúdo de clorofilas e das atividades da SOD no girassol e da APX no cártamo. O objetivo desta análise foi estabelecer se a atividade da SOD e da APX possuem relação direta com o crescimento e o estabelecimento fotossintético das plântulas, e se a inibição da CAT provoca modificação deste padrão de resposta. Esta correlação obteve um alto valor de R2 _{para a atividade da SOD nas plantas de}

girassol tratadas (Figura 12). Por outro lado, nas plântulas de cártamo as correlações da atividade da APX e da SOD não indicaram diferenças significantes entre plântulas tratadas e controle (Figura 13).

Figura 12 - Regressão linear múltipla entre as médias do conteúdo de clorofilas, atividade total da superóxido dismutase (SOD) e o tempo em plântulas de girassol. (A) Plantulas de controle; (B) Plantulas tratadas com 3-AT. O plano azul a representa a tendência da correlação e as esferas amarelas indicam o valor real das médias. O valor de R2 _{indica o coeficiente de correlação entre os}

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Figura 13 - Regressão linear múltipla em plântulas de cártamo. (A) Correlação entre a atividade total da ascorbato peroxidase, conteúdo de clorofilas e o tempo nas plantulas de controle; (B) Correlação entre a atividade total da superóxido dismutase, conteúdo de clorofilas e o tempo nas plantulas de controle; (C) Correlação entre a atividade total da ascorbato peroxidase, conteúdo de clorofilas e o tempo nas plantulas tratadas com 3-AT; (D) Correlação entre a atividade total da superóxido dismutase, conteúdo de clorofilas e o tempo nas plantulas tratadas com 3-AT. O plano azul a representa a tendência da correlação e as esferas amarelas indicam o valor real das médias. O valor de R2 _{indica o coeficiente de correlação entre os valores.}

3.2. Influência da inibição da CAT no padrão de expressão de Catalase,