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7 Discussion

7.1 Discussion of the results

7.1.1 First-person experiences of recovery

A literatura mostra que os receptores vanilóides (TRPV1), expressos nas fibras sensoriais aferentes cutâneas, modulam a nocicepção e inflamação neurogênica

(STANDER et al., 2004). Dessa forma, investigou-se a atividade da mistura de α- e β-

amirina em modelos de prurido experimentais induzidos por dextrana T40 e pelo Composto 48/80, avaliando ainda a participação do sistema opióide, assim como, a ação dos triterpenos sobre a degranulação de mastócitos ex vivo induzido pelo composto 48/80.

4.5.1. Efeito da mistura de α- e β-amirina no prurido induzido por dextrana T40

Camundongos Swiss, machos, 25-30 g, divididos em grupos de 8 animais cada, em jejum de sólidos de 18h, foram tratados, via oral, com veículo (3% de Tween 80 em

salina 0,9%, 10 mL/kg), mistura de α- e β-amirina (50, 100 e 200 mg/kg) ou ciproeptadina

(10 mg/kg).

Duas horas após os tratamentos os animais foram colocados para ambientação no local de observação por 30 min, após este período receberam uma injeção subcutânea

(50 µl), na região dorsal da cabeça, de Dextrana T40 (75 mg/kg). Os animais controle

receberam o mesmo volume de salina 0,9%. O prurido foi observado durante 20 min, sendo registrado o prurido em todas as parte do corpo (KURAISHI et al., 1995).

4.5.2. Efeito da mistura de α- e β-amirina no prurido induzido por composto 48/80

Camundongos Swiss, machos, 25-30 g, divididos em grupos de 8 animais cada, em jejum de sólidos de 18 h, foram tratados, via oral, com veículo (3% de Tween 80 em

salina 0,9%, 10 mL/kg), mistura de α- e β-amirina (50, 100 e 200 mg/kg) ou

ciproheptadina (10 mg/kg).

Duas horas após os tratamentos os animais foram colocados para ambientação no local de observação por 30 min, após este período receberam uma injeção subcutânea

(50 µl), na região dorsal da cabeça, de composto 48/80 (3 mg/kg). Os animais controle

receberam o mesmo volume de salina 0,9%. O prurido foi observado durante 20 min, sendo registrado o prurido no nariz com as patas dianteiras e traseiras e o prurido no local de injeção com as patas traseiras (KURAISHI et al., 1995).

4.5.3. Efeito da naloxona (antagonista de receptores opióides) sobre a atividade antipruriginosa da mistura de α- e β-amirina ou morfina no prurido induzido por composto 48/80

Para avaliar a participação do sistema opióide na atividade antipruriginosa da

mistura de α- e β-amirina, camundongos Swiss, machos, 25-30 g, divididos em grupos de

8 animais cada, em jejum de sólidos de 18h, foram tratados com veículo (3% de Tween 80

naloxona (2 mg/kg, i.p.) ou morfina (7,5 mg/kg, s.c.) 30 minutos antes da administração

subcutânea (50 µl), na região dorsal da cabeça, de composto 48/80 (3 mg/kg).

Os animais controle receberam o mesmo volume de salina 0,9%. O prurido foi observado durante 20 min, sendo registrado o prurido no nariz com as patas dianteiras e traseiras e o prurido no local de injeção com as patas traseiras (KURAISHI et al., 1995).

4.5.4. Efeito da mistura de α- e β-amirina sobre a degranulação de mastócitos ex vivo

Ratos Wistar, machos, 150-180 g, em jejum de sólidos de 18 h, divididos em grupos de 4 animais cada, foram tratados com salina 0,9% (0,1 mL/10 g, v.o.), veículo (3%

de Tween 80 em salina 0,9%, v.o.), mistura de α- e β-amirina (100 mg/kg, v.o.) ou

cetotifeno (1 mg/kg, v.o.).

Após 2 h, os animais foram sacrificados, os mesentérios retirados e colocados em tubos de ensaio contendo solução de Ringer (10 mL). A degranulação dos mastócitos foi induzida pela incubação dos mesentérios, dos respectivos grupos, com Composto 48/80

(concentração final de 0,4 µg/mL). O mesmo volume de água destilada foi adicionado aos

tubos de ensaio contendo o mesentério de animais que receberam somente salina.

Após 30 minutos de incubação, os mesentérios foram montados em lâminas de vidro e corados com azul de toluidina 0,1% para a observação dos mastócitos degranulados em microscopia ótica. A contagem dos mastócitos íntegros e degranulados

foi realizada em cinco campos de cada lâmina e o resultado expresso como a percentagem de mastócitos degranulados (NORTON, 1954).

Com o intuito de corroborar com os resultados obtidos na investigação antipruriginosa das amirinas, avaliou-se os efeitos da mistura dos triterpenos em modelos de edema de pata induzido por conhecidos agentes degranuladores de mastócitos: dextrana T40 e Composto 48/80, além de histamina e serotonina

4.5.5. Efeito da mistura de α- e β-amirina no edema de pata induzido por dextrana T40

Camundongos Swiss, machos, 25-30 g, divididos em grupos de 8 animais cada, em jejum de sólidos de 18h, foram tratados, via oral, com veículo (3% de Tween 80 em

salina 0,9%, 10 mL/kg), mistura de α- e β-amirina (50, 100 e 200 mg/kg) ou

ciproheptadina (10 mg/kg). Uma hora após os tratamentos os animais receberam uma

injeção subplantar (50 µl) de dextrana 150 mg/kg e o mesmo volume de salina na pata

contralateral.

Após 2h os animais foram sacrificados, as patas cortadas e pesadas e o edema expresso, em miligramas, pela diferença de peso entre a pata que recebeu dextrana e a pata contralateral que recebeu salina (WINTER et al., 1962).

4.5.6. Efeito da mistura de α- e β-amirina no edema de pata induzido por composto 48/80

Camundongos Swiss, machos, 25-30 g, divididos em grupos de 8 animais cada, em jejum de sólidos de 18 h, foram tratados, via oral, com veículo (3% de Tween 80 em

salina 0,9%, 10 mL/kg), mistura de α- e β-amirina (50, 100 e 200 mg/kg) ou ciproeptadina

(10 mg/kg). Uma hora após os tratamentos os animais receberam uma injeção subplantar

(50 µl) de composto 48/80 (10 mg/kg) e o mesmo volume de salina na pata contralateral.

Após 2h os animais foram sacrificados, as patas cortadas e pesadas e o edema expresso em miligramas, pela diferença de peso entre a pata que recebeu Composto 48/80 e a pata contralateral que recebeu salina (WINTER et al., 1962).

4.5.7. Efeito da mistura de α- e β-amirina no edema de pata induzido por histamina

Camundongos Swiss, machos, 25-30 g, divididos em grupos de 8 animais cada, em jejum de sólidos de 18h, foram tratados, via oral, com veículo (3% de Tween 80 em

salina 0,9%, 10 mL/kg), mistura de α- e β-amirina (50, 100 e 200 mg/kg) ou ciproeptadina

(10 mg/kg). Uma hora após os tratamentos os animais receberam uma injeção subplantar

(50 µl) de histamina 10 mg/kg e o mesmo volume de salina na pata contralateral.

Após 2 h os animais foram sacrificados, as patas cortadas e pesadas, sendo o edema expresso em miligramas, pela diferença de peso entre a pata que recebeu histamina e a pata contralateral que recebeu salina (WINTER et al., 1962).

4.5.8. Efeito da mistura de α- e β-amirina no edema de pata induzido por serotonina

Camundongos Swiss, machos, 25-30 g, divididos em grupos de 8 animais cada, em jejum de sólidos de 18h, foram tratados, via oral, com veículo (3% de Tween 80 em

salina 0,9%, 10 mL/kg), mistura de α- e β-amirina (50, 100 e 200 mg/kg) ou

ciproheptadina (10 mg/kg). Uma hora após os tratamentos os animais receberam uma

injeção subplantar (50 µl) de serotonina 10 mg/kg e o mesmo volume de salina na pata

contralateral.

Após 2h os animais foram sacrificados, as patas cortadas e pesadas, sendo o edema expresso em miligramas, pela diferença de peso entre a pata que recebeu serotonina e a pata contralateral que recebeu salina (WINTER et al., 1962).