Styrets rolle og funksjon

Para esta parte do experimento foram utilizados 10 pré- molares humanos extraídos e armazenados em solução salina fisiológica, que tiveram suas raízes cortadas na junção esmalte/cemento. As coroas foram seccionadas longitudinalmente no sentido mésio-distal em duas metades: vestibular e lingual, e posteriormente cada metade foi seccionada em quatro partes (Figura 9). Em seguida os espécimes foram colocados em cuba ultrassônica durante 15 minutos para limpeza e, após, foram divididos em nove grupos (Quadro 3):

- Grupo 1 (n=10): aplicação de gel de peróxido de hidrogênio 35%, seguida de fotoativações com aparelho de LED. Em seguida foi realizada aplicação tópica de gel de flúor fosfato; - Grupo 2 (n=10): aplicação de gel de peróxido de hidrogênio

35%, seguida de fotoativações com aparelho de LED;

- Grupo 3 (n=10): aplicação de gel de peróxido de hidrogênio 35%. Em seguida foi realizada aplicação de gel de flúor fosfato; - Grupo 4 (n=10): aplicação de gel de peróxido de hidrogênio

35%;

- Grupo 5 (n=10): aplicação de peróxido de carbamida 35%, seguida de fotoativações com aparelho de LED. Em seguida foi realizada aplicação de gel de flúor fosfato;

- Grupo 6 (n=10): aplicação de gel de peróxido de carbamida 35%, seguida de fotoativações com aparelho de LED;

- Grupo 7 (n=10): aplicação de gel de peróxido de carbamida 35%. Em seguida foi realizada aplicação de gel de flúor fosfato; - Grupo 8 (n=10): aplicação de gel de peróxido de carbamida

35%.

QUADRO 3 – Divisão dos grupos experimentais para posterior avaliação das alterações do esmalte.

Grupos Agente clareador Fotoativação Procedimento imediato

após o clareamento

G1 Peróxido de

hidrogênio 35% LED flúor (4 min)Aplicação tópica de ĺsaliva artificial

G2 Peróxido de

hidrogênio 35% LED Saliva artificial

G3 Peróxido de

hidrogênio 35% ____ flúor (4 min)Aplicação tópica de ĺsaliva artificial

G4 Peróxido de

hidrogênio 35%

____ Saliva artificial

G5 Peróxido de

carbamida 35% LED flúor (4 min)Aplicação tópica de ĺsaliva artificial

G6 Peróxido de

carbamida 35% LED Saliva artificial

G7 Peróxido de

carbamida 35% ____ flúor (4 min)Aplicação tópica de ĺsaliva artificial

G8 Peróxido de

carbamida 35% ____ Saliva artificial G9

FIGURA 9 – Delineamento experimental.

Para o clareamento, o peróxido de hidrogênio 35% Whiteness HP (FGM Produtos Odontológicos Ltda. – Joinville - Brasil) utilizado nos grupos 1, 2, 3 e 4 foi aplicado com o auxílio de um pincel, seguindo as instruções do fabricante. Para isto, foi obtido um gel pela mistura de uma fase chamada Peróxido (peróxido de hidrogênio 45-50%) com outra fase chamada Espessante. O gel obtido, de coloração

vermelha, foi aplicado na superfície vestibular dos dentes, formando uma camada de aproximadamente 2mm de espessura.

Nos grupos 1 e 2, o gel de peróxido de hidrogênio foi colocado na superfície vestibular e após 2 minutos foi realizada fotoativação inicial com diodos emissores de luz (LED). Foram realizadas duas fotoativações utilizando o aparelho Three Light (Clean Line – São José dos Campos) em alta intensidade, de 40 segundos cada, com intervalo de 2 minutos entre as fotoativações e aguardando 14 minutos e 40 segundos até totalizar 20 minutos de aplicação. Após 20 minutos, o dente foi lavado com água durante 1 minuto, e realizada uma nova aplicação do gel clareador, seguindo os mesmos procedimentos anteriormente citados, totalizando 40 minutos de aplicação do gel (2 aplicações de 20 minutos cada). (Figura 10)

FIGURA 10 – Passos operatórios do clareamento nos grupos com fotoativação.

Nos grupos 3 e 4, o gel de peróxido de hidrogênio foi aplicado e mantido por 40 minutos na superfície vestibular dos dentes, com uma renovação após 20 minutos, sem fotoativação.

O peróxido de carbamida 35% Opalescence Quick (Ultradent – South Jordan – Utah – USA) utilizado nos grupos 5, 6, 7 e 8

Lavagem com água / 1 minuto Aplicação

do gel 2 min Fotoativação40 seg

Fotoativação 40 seg

14min 40seg 2 min

foi aplicado com o auxílio de uma seringa na superfície vestibular dos dentes, formando uma camada de aproximadamente 2mm de espessura.

Nos grupos 5 e 6, foram realizadas duas aplicações do gel de peróxido de carbamida sendo que, após a aplicação, foram aguardados 2 minutos e em seguida realizada a fotoativação, seguindo os mesmos procedimentos realizados para os grupos 1 e 2 - peróxido de hidrogênio.

Nos grupos 7 e 8, o gel de peróxido de carbamida foi aplicado e mantido por 40 minutos na superfície vestibular dos dentes, com renovação após 20 minutos, sem fotoativação.

Ao término do clareamento, os espécimes foram novamente lavados com água durante 1 minuto.

Nos grupos 1, 3, 5 e 7, após a lavagem foi aplicado o gel de flúor fosfato neutro incolor (Flúor tópico gel – DFL Indústria e Comércio S.A. – Rio de Janeiro - Brasil) sobre a superfície dos espécimes, permanecendo por 4 minutos, e seguido de lavagem com água corrente por 2 minutos.

Após a realização do clareamento, os espécimes foram mantidos em saliva artificial (Anexo B) durante 30 minutos a 37º C. Em seguida, realizou-se a lavagem durante 1 minuto em água corrente. Em seguida, cada fragmento foi preparado para leitura em microscópio eletrônico de varredura e espectrômetro de energia dispersiva.

4.2.1 Análise morfológica da superfície do esmalte e Espectrômetro de energia dispersiva

Para esta análise, os espécimes foram desidratados utilizando-se soluções concentradas de etanol (25, 50, 75 e 90%, permanecendo por 20 minutos em cada uma) e em etanol absoluto

(100%) por uma hora. Os espécimes foram retirados da solução e deixados em estufa a 37º C até o dia seguinte.

A preparação dos espécimes para as análises morfológicas e em espectrômetro de energia dispersiva (EDS) foi realizada em microscópio eletrônico de varredura (Scanning microscope – JSM – 840A Jeol, Tokyo, Japão). Para isto, os espécimes foram montados em stubs e metalizados com a aplicação de uma fina camada de ouro (200 ǖ) em um evaporador de alta pressão (DV-502 - Denton NJ). Para cada espécime, o microscópio eletrônico foi posicionado a uma distância de trabalho de aproximadamente 25 mm; uma área de 200µm2 foi irradiada com uma voltagem de 15 V por 100 segundos, tendo uma penetração do feixe de elétrons de 1µm de profundidade. As avaliações em EDS quantificaram os níveis de cálcio, fósforo, oxigênio e outros componentes dos tecidos.

As avaliações por MEV foram descritivas e ilustrativas a fim de correlacionar as alterações dos elementos químicos vistas no EDS, com as alterações morfológicas.

4.2.2 Análise Estatística

Após as mudanças dos níveis dos elementos químicos terem sido obtidas para avaliar se existem diferenças entre os grupos, foi realizado o teste de Kruskal-Wallis (5%). Confirmada esta diferença, aplicou-se o teste de comparação múltipla de Dunn (5%), que permitiu verificar quais grupos diferiram entre si.

5 RESULTADOS