Selvbestemmelse

Perda de massa fresca (%)

Através da pesagem diária de três repetições de cada período de referência em balança semi-analitica, considerando-se a massa inicial, o percentual foi obtido por diferença durante o armazenamento em relação ao peso inicial.

Firmeza (N)

Determinada através do penetrômetro Magness Taylor Pressure Tester, região de inserção de 2/16 polegadas de diâmetro, sendo feita 1 leitura por semicírculo contido na bandeja.

Potencial Hidrogeniônico – pH

Utilizando potenciômetro digital, conforme método 017/IV do Instituto Adolfo Lutz (IAL, 2005).

Sólido Solúveis (SS - %)

Por leitura direta com refratômetro tipo Abbe com controle de temperatura (20 °C) conforme metodologia da Association of Official Analytical Chemistry – AOAC (1984); Acidez Titulável (AT – g ácido cítrico.100g-1₎

Determinada por titulometria com uso de solução de hidróxido de sódio (NaOH) 0,1M e indicador fenolftaleína até obtenção de coloração róseo claro permanente, utilizando-se 10 g da amostra em 50 mL de água destilada conforme método 016/IV do Instituto Adolfo Lutz (IAL, 2005). O cálculo para expressão dos resultados foi feito conforme a fórmula:

× � × � × �� ⁄ × � × � , em que V = volume, em mL, gasto de NaOH na titulação; F = fator de correção da solução de hidróxido de sódio; M = molaridade da solução de NaOH; PM = peso molecular do ácido correspondente em g; P = massa da amostra em g e n = o número de hidrogênios ionizáveis do ácido predominante na amostra;

Relação SS/AT

Obtida mediante divisão dos índices de SS pelos resultados de AT (CHITARRA e CHITARRA, 2005);

Permeabilidade de membrana – (%)

Por meio de condutivímetro de bancada, utilizando-se 10 g da amostra em 75 mL de água deionizadas (PALMA et al., 1995), segundo ajustes propostos por Zhao (2006), utilizando para expressão dos resultados a relação dos valores da primeira medição de condutividade (após 30 minutos a 24 °C) pela segunda medição de condutividade (após 15 minutos a 95 °C seguido de resfriamento) multiplicado por 100.

3.2.5 Qualidade funcional

Ácido ascórbico (mg.100g-1₎

Determinado por titulometria, utilizando-se solução de DFI (2,6-dicloro-fenol- indofenol 0,002%) em 50 mL de ácido oxálico 0,5%, conforme Strohecker e Henning (1967).

Licopeno e β-caroteno (mg.100g-1₎

Determinados de acordo Nagata e Yamashita (1992), com algumas adaptações. Macerou-se, durante 2 minutos, 1 g de amostra com 5 mL de solução 2:3 de acetona + hexano. Após a maceração, o volume do extrato foi completado para 10 mL em tubos Falcon de 15 mL que, em seguida, foram agitados por 1 minuto e centrifugados a 25 °C em 9.000 rpm para que se efetuassem as leituras em espectrofotômetro nos comprimentos de onda de 453, 505, 645 e 663 nm. Os resultados foram expressos em mg.100g-1_.

Flavonoides Amarelos (mg.100g-1₎

Quantificados, com adaptações, conforme Francis (1982), em que utilizou-se 7 mL de solução extratora de etanol 95% + HCl 1,5 mol.L-1 _{(85:15) em 7 g de amostra pesados em tubo}

Falcon de 15 mL. Homogeneizou-se a mistura entre amostra e solução extratora por 2 minutos em agitador de tubos e manteve-se reservada, por 12 horas, ao abrigo da luz e sob refrigeração para extração. Após esse período, os extratos foram filtrados e a absorbância a 374 nm pode ser determinada. Todos os procedimentos desta determinação ocorreram no escuro.

Obtenção do extrato para determinação dos polifenóis extraíveis totais e da atividade antioxidante

Os extratos foram obtidos conforme Dantas (2015). Resumidamente, em tubos tipo Falcon de 15 mL, pesaram-se 3g de cada amostra e adicionaram-se 4 mL de metanol 50%. Os tubos foram agitados por 1 minuto e mantidos em repouso, no escuro, durante 1 hora. O extrato foi centrifugado a 4 ° C em 15.000 rpm, durante 15 minutos. O sobrenadante foi reservado e ao resíduo foram adicionados 4 mL de acetona 70%, deixando-se extrair por 1 hora, sendo centrifugado em seguida por 15 minutos em 15.000, a 4 ° C. Os dois sobrenadantes foram reunidos e o volume final do tudo ajustado para 10 mL com água destilada. Os extratos foram mantidos a -20 ° C até serem analisados. Todo o procedimento foi realizado no escuro.

Polifenóis Extraíveis Totais – PET (mg.100g-1₎

O conteúdo total de polifenóis extraíveis foram determinados por espectrofotometria pelo método de Folin-Ciocalteu, com modificações (DANTAS et al., 2015). Foi tomada uma alíquota do extrato de 150 µL, a qual foi diluída para 1000 mL com água destilada. A essa diluição acrescentou-se 1,0 mL de reagente de Folin-Ciocalteu, 2,0 mL de carbonato de sódio 20% e 2,0 mL de água destilada. Agitou-se o tubo de ensaio, manteve-se em repouso, ao abrigo da luz, por 30 minutos e realizou-se a leitura em espectrofotómetro a 700 nm. O teor estimado de compostos fenólicos foi obtido utilizando-se uma curva padrão de ácido gálico (R = 0,9983) e os resultados expressos em mg de ácido gálico por 100g de peso fresco.

Atividade Antioxidante Total – AAT (g de polpa. g DPPH-1₎

Determinada mediante sequestro do radical livre DDPH (1,1’-diphenil-2-picrilhidrazil) (BRAND-WILIAMS et al., 1995). A partir do extrato fenólico, foram preparadas as diluições de 200, 400 e 600 µL.mL-1_{, das quais utilizou-se um alíquota de 100 µL para 3,9 mL do radical}

DPPH (0,06 mM). Como controle utilizou-se 100 µL da solução controle (álcool metílico 50% + acetona 70%) ao invés do extrato fenólico. Álcool metílico PA foi utilizado para a calibração do espectrofotômetro, no comprimento de onda de 515 nm. Todas as etapas desta determinação foram realizadas no escuro. O cálculo da AAT (g de fruta/ g DPPH) levou em conta a equação da reta, a partir da absorbância das três diluições, substituindo-se em seguida na equação a absorbância equivalente a 50% da concentração do DPPH (absorbância inicial do controle/2), encontrando-se a quantidade da amostra necessária para reduzir em 50% a concentração inicial do radical DPPH (EC50). Para esta determinação, todo procedimento foi realizado na ausência de luz.

Atividade Antioxidante Total – AAT (μM de Trolox. g de polpa-1₎

Avaliada pela captura do radical livre ABTS• +. A preparação do radical consistiu de mistura de 5 ml da solução de ABTS• + a concentração de 7 mM, com 88 µL da solução de persulfato de potássio a 140 mM, deixando em repouso à temperatura ambiente durante 16 horas na ausência de luz. Antes do ensaio, o radical foi diluída com etanol até a absorbância de 0,700 ± 0,05, medido a 734 nm. A partir dos extratos fenólicos, foram preparadas três diluições de 50, 150 e 300 mg.mL-1_{. A uma alíquota de 3,0 ml do radical ABTS}• + _{(absorbância de 0,700)}

foram adicionados 30 µL de cada diluição e, após 6 minutos, a absorbância foi lida a 734 nm. O Trolox foi utilizado como padrão, com uma curva padrão de 100 a 2000 µm (R = 0,997). Os resultados foram expressos em µM de Trolox. g de peso fresco (DANTAS et al., 2015).