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Todos os ensaios foram realizados do mesmo modo, diferindo apenas na toma dos volumes e na lama utilizada com ou sem inibidor de nitrificação (ATU), dependendo do teste que se estava a executar. O volume de todos os ensaios foi de 20 ml. Sendo a soma total da biomassa com o composto sintético metade do volume de ensaio.

A - Teste de inibição da respiração

I - As tomas que devem ser feitas nos ensaios são as referidas no Quadro I.

II- Preparar o volume da substância com a água de diluição correspondente para cada tubo devidamente identificados no suporte próprio.

III - Colocar a lama sintética seguida de uma barra de agitação magnética em cada tubo. IV- Colocar o set de tubos no banho termostatizado do Strathtox.

V- Carregar em Start para iniciar a gravação do teste.

VI – Colocar o volume de lama activada recirculada correspondente em cada tubo, de imediato coloca-se o sensor (este passo tem de ser rápido de modo a fazer uma correcta leitura de oxigénio inicial, isto porque a biomassa começa a consumir oxigénio de forma imediata quando entra em contacto com a substância).

Nota: Tratando-se de um teste em célula fechada é muito importante efectuar o passo VI com extremo cuidado de modo a evitar a formação de bolhas.

VII – Para concluir o teste carregar no Stop. O teste deve dar-se por terminado quando todo o oxigénio no tubo de controlo tenha sido consumido, ou pelo menos quando este tiver registado uma depleção de 50% no mínimo.

Nota: Previamente abrir um ficheiro e selecionar no software as opções correspondentes a cada teste – Para mais detalhes consultar manual de instruções do equipamento.

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Quadro I. Valores de referência para a execução dos testes de inibição da respiração e nitrificação

Sensor nº Biomassa - com ou sem ATU - (ml) Composto Sintético (ml) H2O desionizada (ml) Amostra Testada (ml) Amostra Testada (%) 1 (Controlo) 8 2 10 0 0 2 8 2 8 2 20 3 8 2 6 4 40 4 8 2 4 6 60 5 8 2 2 8 80 6 8 2 0 10 100

B - Testes de inibição da nitrificação

Nota prévia: No frasco de lama semi-dividido, colocar para 300 ml de lama, 3ml da solução prepara de ATU (ver referências do fabricante), deixar arejar 30 minutos antes de utilizar.

I - As tomas que devem ser feitas nos ensaios são as referidas no quadro I. Nota: Preparar, em simultâneo, 2 set iguais.

II- Preparar o volume da substancia com a água de diluição correspondente para cada tubo devidamente identificados no suporte próprio.

III - Colocar a lama sintética seguida de uma barra de agitação magnética em cada tubo. IV- Colocar o set de tubos no banho termostatizado do Strathtox.

V- Carregar em Start para iniciar a gravação do teste.

VI – Colocar o volume de lama activada recirculada correspondente em cada tubo, de imediato coloca-se o sensor (este passo tem de ser rápido de modo a fazer uma correcta leitura de oxigénio inicial, isto porque a biomassa começa a consumir oxigénio de forma imediata quando entra em contacto com a substância).

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Nota: Tratando-se de um teste em célula fechada é muito importante fazer o passo VI com extremo cuidado de modo a evitar a formação de bolhas.

VII – Para concluir a primeira parte do teste carregar em Stop. O teste deve dar-se por terminado quando todo o oxigénio no tubo de controlo tenha sido consumido, ou pelo menos quando este tiver registado uma depleção de 50% no mínimo.

VIII – Retirar o primeiro set do Strathtox, limpando convenientemente os sensores, até que o oxigénio seja o de referencia para a temperatura de trabalho (ver manual de instruções).

IX- Repetir o passo IV e V.

X - Colocar o volume de lama activada recirculada com a ATU correspondente em cada tubo, de imediato coloca-se o sensor (este passo tem de ser rápido de modo a fazer uma correcta leitura de oxigénio inicial, isto porque a biomassa começa a consumir oxigénio de forma imediata quando entra em contacto com a substância).

Nota: Tratando-se de um teste em célula fechada é muito importante fazer o passo X com extremo cuidado de modo a evitar a formação de bolhas.

XI – Para concluir o teste carregar em Stop. O teste deve dar-se por terminado quando todo o oxigénio no tubo de controlo tenha sido consumido, ou pelo menos quando este tiver registado uma depleção de 50% no mínimo.

Nota: Abrir previamente um ficheiro e seleccionar no software as opções correspondentes a cada teste – Para mais detalhe consultar manual de instruções do equipamento.

C - Teste de Saúde

I - As tomas que devem ser feitas nos ensaios são as referidas no Quadro II.

II- Fazer a toma da água desionizada para cada tubo devidamente identificados no suporte próprio.

III - Colocar a lama sintética seguida de uma barra de agitação magnética em cada tubo. IV- Colocar o set de tubos no banho termostatizado do Strathtox.

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VI – Colocar o volume de lama activada recirculada correspondente nos 3 primeiros tubos (nº 1,2 e 3), e nos 3 tubos finais (nº 4, 5 e 6) coloca-se de lama activada recirculada com ATU de imediato coloca-se o sensor (este passo tem de ser rápido de modo a fazer uma correcta leitura de oxigénio inicial, isto porque a biomassa começa a consumir oxigénio de forma imediata quando entra em contacto com a substância). Nota: Tratando-se de um teste em célula fechada é muito importante fazer o passo VI com extremo cuidado de modo a evitar a formação de bolhas.

VII – Para concluir o teste carregar em Stop. O teste deve dar-se por terminado quando todo o oxigénio nos 3 primeiros tubos tenha sido consumido, ou pelo menos quando este tiver registado uma depleção de 50% no mínimo.

Nota: Abrir previamente um ficheiro e seleccionar no software as opções correspondentes a cada teste – Consultar manual de instruções do equipamento.

Quadro II-Valores de referência para a execução dos testes saúde e optimização de processo

Sensor nº Biomassa - com ou sem ATU - (ml) Composto Sintético (ml) H2O desionizada (ml) 1 (Controlo) 8 2 10 2 8 2 10 3 8 2 10 4 8 2 10 5 8 2 10 6 8 2 10

D - Teste de optimização de processo

I - As tomas que devem ser feitas nos ensaios são as referidas no quadro II.

II- Fazer a toma da água desionizada para cada tubo devidamente identificados no suporte próprio.

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III - Colocar a lama sintética seguida de uma barra de agitação magnética em cada tubo. IV- Colocar o set de tubos no banho termostatizado do Strathtox.

V- Carregar em Start para iniciar a gravação do teste.

VI – Colocar o volume de lama activada recirculada e de imediato coloca-se o sensor (este passo tem de ser rápido de modo a fazer uma correcta leitura de oxigénio inicial, isto porque a biomassa começa a consumir oxigénio de forma imediata quando entra em contacto com a substância).

Nota: Tratando-se de um teste em célula fechada é muito importante fazer o passo VI com extremo cuidado de modo a evitar a formação de bolhas.

VII – Para concluir o teste carregar em Stop. O teste deve dar-se por terminado quando todo o oxigénio tiver sido consumido.

Nota: Abrir previamente um ficheiro e seleccionar no software as opções correspondentes a cada teste – Consultar manual de instruções do equipamento.

D - Teste de CBOcurto -rapidamente biodegradável

I - As tomas que devem ser feitas nos ensaios são as referidas no quadro III.

II- Fazer a toma da água desionizada para cada tubo devidamente identificados no suporte próprio.

III - Colocar a quantidade de amostra a analisar em cada tubo seguida de uma barra de agitação magnética.

Nota: Não é necessário lama sintética pois pretende-se medir unicamente a matéria biodegradável da amostra que a biomassa conseguirá degradar.

IV- Colocar o set de tubos no banho termostatizado do Strathtox. V- Carregar em Start para iniciar a gravação do teste.

VI – Colocar o volume de lama activada recirculada e de imediato colocar o sensor (este passo tem de ser rápido de modo a fazer uma correcta leitura de oxigénio inicial, isto porque a biomassa começa a consumir oxigénio de forma imediata quando entra em contacto com a substância).

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Nota: Tratando-se de um teste em célula fechada é muito importante fazer o passo VI com extremo cuidado de modo a evitar a formação de bolhas.

VII – Para concluir o teste carregar em Stop. O teste deve dar-se por terminado em 30 min ou 3 horas, dependendo do estado da biomassa.

Nota: Abrir previamente um ficheiro e seleccionar no software as opções correspondentes a cada teste – Consultar manual de instruções do equipamento.

Quadro III- Valores de referência para a execução dos testes CBO curto

Sensor nº Biomassa - com ou sem ATU - (ml) Água desionizada (ml) Amostra a analisar (ml) 1 (Controlo) 6 14 0 2 6 13,9 0,1 3 6 13,8 0,2 4 6 13,5 0,5 5 6 13,2 0,8 6 6 13,0 1,0

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