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Normagenter og internaliserte normer

2.2 Normer og normering

2.2.2 Normagenter og internaliserte normer

De modo geral, a detecção de proteínas nas amostras dos tecidos originais foi maior do que nos tecidos de calos. Esse fato pode ter sido ocasionado pela diferença do material ou pela metodologia de extração utilizada, a qual foi maceração em nitrogênio líquido e centrifugação. A maceração pode ser um método ineficaz de extração proteica, e por isso a digestão tríptica não foi capaz de fornecer peptídeos que fossem similares aos depositados no banco de dados. A extração foi a mesma utilizada nos tecidos de calos, mas para o tecido original pode-se sugerir a integração do método de maceração e centrifugação com outras metodologias que tornem a extração mais eficiente. Contudo a análise proteômica mostrou-se relevante na caracterização dos calos e dos tecidos, pois mostrou a eficiência da extração em cada tecido, identificou peptídeos relacionados a proteínas únicas de cada tipo de amostra, e principalmente, identificou proteínas comuns entre eles. A abordagem também possibilitou visualizar possíveis papéis fisiológicos das proteínas dos calos, as quais apresentaram papéis principalmente relacionados à defesa. Esse fato pode ter relação com a função dos calos na natureza, o qual é produzido em situações de injúria.

O estudo proteômico, aliado à análise eletroforética e à atividade hemaglutinante, mostraram fortes indício da presença da lectina frutapina nos tecidos de calos, reforçando a importância da presença de uma lectina manose- ligante no desenvolvimento desse tecido.

O estudo desenvolvido pode ser complementado com outras perspectivas, como a visualização deste painel proteico por eletroforese bidimensional, além de sugerir a otimização de métodos de extração, investigação de outros tecidos, investigação de DNA e RNA de moléculas de interesse no tecido, ensaios de atividade biológica, dentre outros.

6. CONCLUSÃO

Os resultados obtidos neste trabalho mostram a eficiência na metodologia de produção de calos caulinares e foliares de A. incisa, apesar das dificuldades apresentadas para espécies lenhosas, pois conseguiu-se um percentual de produção de 88%. A quantificação de proteínas totais mostrou que os explantes de caule e folha apresentam maior quantidade de proteínas quando comparados com os calos, e esse fato pode estar relacionado com o grau de diferenciação do tecido. A análise histológica não revelou diferenças entre os calos caulinares e foliares, contudo, foi útil para mostrar que as células apresentavam características de calos friáveis e em pleno crescimento. A abordagem proteômica permitiu identificar peptídeos que apresentam similaridade com proteínas vegetais descritas, e identificou maior número de proteínas nos calos do que nos tecidos originais. Pode- se destacar a presença de uma lectina semelhante à KM+ em ambas as amostras de calos, o que pode ser um indício da presença de frutapina nos calos. Essa suspeita foi reforçada com os ensaios preliminares de eletroforese e atividade hemaglutinante, o que leva a crer que essa lectina apresenta um importante papel fisiológico no desenvolvimento desse tecido. Além disso, a proteômica permitiu a detecção de diversas proteínas relacionadas à defesa vegetal, e esse fato pode ter relação com o papel dos calos na natureza, pois são tecidos encontrados em situações de injúria. Portanto, o presente trabalho serviu como um passo inicial para o entendimento da bioquímica e fisiologia dos calos de A. incisa L., e fornece uma base para estudos mais aprofundados desse tecido e das proteínas que o constituem.

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