No decorrer do desenvolvimento deste projeto revelaram-se algumas necessidades de eventuais linhas de investigação para projetos futuros.
Como tal, seria pertinente avaliar a influência de outras variáveis, tais como o pH e a temperatura, no processo de extração das proteases aspárticas, de forma a otimizar o processo de extração.
No que diz respeito à purificação das proteases aspárticas, seria interessante testar outras técnicas, tais como a ultrafiltração e/ou técnicas cromatográficas, de forma a obter um extrato enzimático mais puro.
Também seria importante avaliar os efeitos dos coagulantes obtidos sobre os parâmetros de textura (dureza, elasticidade e coesividade) e sabor do queijo assim como avaliar os efeitos de um coagulante vegetal comercial sobre esses mesmos parâmetros, de forma a efectuar a sua comparação.
No decorrer do desenvolvimento deste projeto revelaram-se algumas necessidades de eventuais linhas de investigação para projetos futuros.
Como tal, seria pertinente avaliar a influência de outras variáveis, tais como o pH e a temperatura, no processo de extração das proteases aspárticas, de forma a otimizar o processo de extração.
No que diz respeito à purificação das proteases aspárticas, seria interessante testar outras técnicas, tais como a ultrafiltração e/ou técnicas cromatográficas, de forma a obter um extrato enzimático mais puro.
Também seria importante avaliar os efeitos dos coagulantes obtidos sobre os parâmetros de textura (dureza, elasticidade e coesividade) e sabor do queijo assim como avaliar os e coagulante vegetal comercial sobre esses mesmos parâmetros, de forma a efectuar a sua comparação.
Referências Bibliográficas
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Anexos
y = 1,650x + 0,068 R² = 0,994 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 Abs (n m) CBSA(g/L)
Figura i- Curva de calibração obtida pelo método de Lowry para a concentração de proteínas.
Tabela i- Absorvâncias dos coagulantes obtidos pela precipitação com acetona, para determinação
da concentração de proteínas.
Razão de extrato
bruto:acetona Absorvância (nm) Média
1:1 0,394 0,374 0,417 0,395
1:2 0,553 0,595 0,548 0,565
1:4 0,825 0,733 0,879 0,812
1:6 0,627 0,683 0,651 0,654
Tabela ii- Absorvâncias dos coagulantes obtidos pela precipitação com etanol, para
determinação da concentração de proteínas.
Razão de extrato
bruto:etanol Absorvância (nm) Média
1:1 - - - -
1:2 0,713 0,736 0,751 0,733
1:4 0,518 0,499 0,480 0,499
Tabela iii- Tempos dos coagulantes, obtidos pela precipitação com acetona, para a
determinação da atividade coagulante.
Tabela iv- Tempos dos coagulantes obtidos pela precipitação com etanol, para determinação da
atividade coagulante.
Tabela v- Absorvâncias dos coagulantes obtidos pela precipitação com acetona, para
determinação da atividade proteolítica.
Razão de extrato
bruto:acetona tempo (seg) Média
1:1 - - - -
1:2 734 738 741 737,7
1:4 414 417 416 415,7
1:6 273 286 274 277,7
Razão de extrato
bruto:etanol tempo (seg) Média
1:1 - - - -
1:2 624 632 629 628,3
1:4 198 196 193 195,7
1:6 356 349 357 354,0
Razão de extrato
bruto:acetona Absorvância (nm) Média
1:1 0,04 0,054 0,048 0,047
1:2 0,507 0,499 0,508 0,505
1:4 0,705 0,711 0,709 0,708
Tabela vi- Absorvâncias dos coagulantes obtidos pela precipitação com etanol, para
determinação da atividade proteolítica.
Razão de extrato
bruto:etanol Absorvância (nm) Média
1:1 - - - -
1:2 0,577 0,579 0,578 0,578
1:4 0,612 0,608 0,61 0,610
1:6 0,809 0,802 0,805 0,805
Tabela vii- Tempos dos coagulantes, obtidos pela precipitação com acetona, para a determinação do poder coagulante.
Tabela viii- Tempos dos coagulantes obtidos pela precipitação com etanol, para determinação
da atividade coagulante.
Razão de extrato
bruto:acetona tempo (seg) Média
1:1 - - - -
1:2 1347 1342 1345 1344,67
1:4 910 915 918 914,33
1:6 564 567 562 564,33
Razão de extrato
bruto:etanol tempo (seg) Média
1:1 - - - -
1:2 1060 1068 1065 1064,33
1:4 492 495 491 492,67
y = 0,908x + 0,004 R² = 0,999 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 A b s (n m ) C GMP (g/L)
Tabela ix- Valores de absorvância do coagulante obtido pela precipitação com acetona na razão
1:6, para caracterização cinética
Tabela x- Valores de absorvância do coagulante obtido pela precipitação com etanol na razão
1:4, para caracterização cinética
t C (min) (g/L) 0 3 6 9 12 15 10 0,057 0,06 0,298 0,23 0,483 0,487 0,719 0,738 0,845 0,761 0,525 0,56 20 0,062 0,061 0,383 0,41 0,7 0,731 1,018 1,069 0,625 0,549 0,791 0,728 30 0,058 0,061 0,57 0,541 0,263 0,254 0,352 0,365 0,458 0,465 0,507 0,532 50 0,065 0,06 0,16 0,168 0,288 0,246 0,335 0,341 0,463 0,479 0,529 0,498 100 0,063 0,052 0,144 0,116 0,207 0,229 0,316 0,33 0,452 0,414 0,524 0,528 t (min) C (g/L) 0 3 6 9 12 15 10 0,046 0,054 0,141 0,14 0,261 0,271 0,371 0,435 0,551 0,56 0,699 0,729 20 0,048 0,057 0,278 0,259 0,529 0,525 0,839 0,858 0,593 0,586 0,754 0,729 30 0,055 0,068 0,334 0,317 0,685 0,706 0,618 0,598 0,812 0,7911 0,522 0,552 50 0,06 0,056 0,379 0,323 0,461 0,481 0,716 0,78 0,401 0,464 0,624 0,522 100 0,051 0,059 0,335 0,382 0,444 0,475 0,775 0,758 0,46 0,501 0,609 0,6