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4 Innsamling av empiri og analyse

4.1 Analyse av intervju

4.1.1 Forhandling omkring begreper

Houve influência do silenciamento no perfil metabólico em sementes de frutos com 10 dias após a antese (DAA) de plantas silenciadas quando comparado com a WT. O conteúdo de aminoácidos, ácidos orgânicos e intermediários do ciclo dos ácidos

sacarose e rafinose apresentaram acúmulo quando comparado com a WT. O conteúdo de mio-inositol não apresentou diferença estatística entre os níveis de silenciamento de

MIPS1 e a WT, apesar da visível redução entre os níveis. O açúcar álcool galactinol

reduziu, enquanto o glicerol aumentou (Figura 4).

Figura 4. Efeito do silenciamento na expressão de MPIS1 no perfil metabólico de sementes de frutos com

10 dias após a antese. Metabólitos foram identificados em sementes de plantas-controle (WT) e plantas apresentando seis níveis de silenciamento da expressão de MIPS1. Os valores obtidos foram normalizados em relação à media das plantas WT e transformados em log2. Diferentes tons de vermelho e azul expressam a extensão das mudanças nos níveis dos metabólitos segundo a barra de referência. Os asteriscos indicam diferença significativa pelo Teste t de Student (p > 0.05) em comparação com os valores obtidos para o WT (n = 6). Os valores absolutos encontram-se nos Dados Suplementares.

Em sementes de 25 DAA, os frutos verdes estão em fase de divisão celular e o perfil metabólico apresentou outro comportamento comparado ao de 10 DAA (Figura 5). Os aminoácidos em sua maioria apresentaram comportamento semelhante ao WT, com exceção da asparagina, com conteúdo reduzido, lisina e tiramina que apresentaram acúmulo. Os ácidos orgânicos apresentaram diferença em acúmulo de metabólitos, em especial nicotinato e quinato. Os intermediários do ciclo TCA apresentaram diferença

novamente em malato no acúmulo do metabólito. Verificou-se também o acúmulo para frutose, glicose e sacarose. O teor de xilose diminuiu, possivelmente influenciada pelo nível de inositol. Os açúcares álcool continuaram sua tendência de acúmulo em glicerol.

Figura 5. Efeito do silenciamento na expressão de MPIS1 no perfil metabólico de sementes de frutos com

25 dias após a antese. Metabólitos foram identificados em sementes de plantas-controle (WT) e plantas apresentando seis níveis de silenciamento da expressão de MIPS1. Os valores obtidos foram normalizados em relação à media das plantas WT e transformados em log2. Diferentes tons de vermelho e azul expressam a extensão das mudanças nos níveis dos metabólitos segundo a barra de referência. Os asteriscos indicam diferença significativa pelo Teste t de Student (p > 0.05) em comparação com os valores obtidos para o WT (n = 6). Os valores absolutos encontram-se nos Dados Suplementares.

Em sementes de frutos com 50 DAA, em que os frutos se encontram em fase de expansão e início da maturação, caracterizado pelo estádio “breaker”, verificou-se em

sugerindo uma redução na atividade metabólica em plantas silenciadas. Verificou-se uma redução significativa dos níveis de vários aminoácidos, entre eles a asparagina, aspartato, glicina, isoleucina, lisina, ornitina, fenilalanina, glutamato, piroglutamato, serina, e tirosina. Os ácidos orgânicos butirato, fosforato, e quinato apresentaram redução; enquanto isobutirato, lactato, nicotinato apresentaram acréscimo no conteúdo.

Os intermediários do ciclo TCA ácido cítrico, ácido fumárico e ácido málico apresentaram redução do conteúdo, quando comparado com a WT. Houve redução nos níveis dos açúcares glicose, sacarose, galactose e rafinose, enquanto frutose e trealose apresentaram acréscimo podendo ser em resposta da redução da conversão de glicose- 6P a mio-inositol, estimulando a síntese de frutose e trealose.

Os açúcares álcool, o mio-inositol e mio-inositol-1P apresentaram redução em dois níveis; o glicerol continuou seu padrão de acúmulo apresentando cinco níveis significativos, enquanto o galactinol, glicerol-3-P e o benzil-álcool acumularam (Figura 6).

Figura 6. Efeito do silenciamento na expressão de MPIS1 no perfil metabólico de sementes de frutos com

50 dias após a antese. Metabólitos foram identificados em sementes de plantas-controle (WT) e plantas apresentando seis níveis de silenciamento da expressão de MIPS1. Os valores obtidos foram normalizados em relação à media das plantas WT e transformados em log2. Diferentes tons de vermelho e azul expressam a extensão das mudanças nos níveis dos metabólitos segundo a barra de referência. Os asteriscos indicam diferença significativa pelo Teste t de Student (p > 0.05) em comparação com os valores obtidos para o WT (n = 6). Os valores absolutos encontram-se nos Dados Suplementares.

padrão em sementes de 50DAA, sendo mais contrastante aos valores de aminoácidos encontrados em plantas-controle. Essa redução significativa foi encontrada em várias das diferentes linhagens silenciadas (Figura 7). Os ácidos orgânicos apresentam redução sendo mais expressivo nos conteúdos de lactato, nicotinato e quinato. Os intermediários do ciclo TCA apresentam redução em fumarato, malato e succinato. Em relação aos sacarídeos, apenas a sacarose apresentou redução. O glicerol reduziu em quatro linhagens silenciadas, enquanto o galactinol aumentou em três linhagens (Figura 7).

Figura 7. Efeito do silenciamento na expressão de MPIS1 no perfil metabólico de sementes de frutos com

60 dias após a antese. Metabólitos foram identificados em sementes de plantas-controle (WT) e plantas apresentando seis níveis de silenciamento da expressão de MIPS1. Os valores obtidos foram normalizados em relação à media das plantas WT e transformados em log2. Diferentes tons de vermelho e azul expressam a extensão das mudanças nos níveis dos metabólitos segundo a barra de referência. Os asteriscos indicam diferença significativa pelo Teste t de Student (p > 0.05) em comparação com os valores obtidos para o WT (n = 6). Os valores absolutos encontram-se nos Dados Suplementares.

3.3.4 Alterações metabólicas em pericarpo de frutos de plantas de tomate em