5 Resultater
5.2.4 Erfaringer med drop-out
Para a realização dos testes de estabilidade oxidativa, foi utilizado o extrato com o maior teor de oleuropeína, proveniente de um dos experimentos tipo III (com razão folhas:solvente igual a 1:3, com a presença de ácido). Massas conhecidas desse extrato liofilizado foram adicionadas aos óleos vegetais selecionados para o estudo (azeite de oliva e óleo de girassol) de modo a fornecer uma quantidade do composto ativo dentro da faixa utilizada em testes similares descritos por Jimenez et al. (2011). A Tabela 9 apresenta os tempos de indução obtidos para os óleos vegetais em três condições: (1) sem a adição dos extratos de folhas de oliva; (2) com a adição de extrato; (3) com o dobro da massa de extrato adicionado em (2). O período de indução pode ser definido como o tempo para atingir o nível de rancidez que seja detectável ou mudança na taxa de oxidação ((DROZDOWSKI & SZUKALSKA, 1987; FRANKEL, 1993; GARCIA MESA et al., 1993; HILL, 1994; GUTIÉRREZ ROSALES, 1989; LAUBLI & BRUTTEL, 1986).
Vale ressaltar que as condições 1 e 3 foram utilizadas apenas para o azeite de oliva, sendo que os dados do tempo de indução para o óleo de girassol na condição 1 foram obtidos por Scharlack (2015).
Tabela 9: Resultados dos tempos de indução obtidos no aparelho Rancimat para as amostras de óleos vegetais com e sem a adição dos extratos de folhas de oliva.
Amostras Condição experimental* Tempos indução (h)** Literatura Azeite extra- virgem 1 24,22 ± 0,41 B 21,3 a 43,51 2 27,15 ± 1,14 A nd 3 25,54 ± 0,08 BA nd Azeite comum 1 14,26 ± 0,32 D 9,02 2 16,52 ± 0,37 C 13,52 3 17,43 ± 0,08 C nd Óleo de girassol bruto 1 5,843 ± 0,04 C 2 4,22 ± 0,32 A nd Óleo de girassol refinado 1 4,753 ± 0,05 BC 2 4,40 ± 0,08 A 21,14
* (1) sem a adição dos extratos de folhas de oliva; (2) com a adição de massa conhecida de extrato de oliva; (3) com a adição do dobro da massa de extrato utilizada em (2).
** Médias seguidas por letra maiúscula iguais na mesma coluna não diferem entre si ao nível de 5% de significância pelo Teste de Duncan.
1: Krichene et al. (2010); 2 Salta et al. (2007); 3 Scharlack (2015); 4 Jimenez et al. (2011). Fonte: Própria autoria.
De acordo com os resultados apresentados na Tabela 9, a adição de extratos de folha de oliva aumentou o tempo de indução, tanto para o azeite extra-virgem como para o comum, porém a adição do dobro de extrato (condição 3) não trouxe vantagens para o aumento da estabilidade oxidativa, visto que os tempos de indução obtidos nesta condição não diferem estatisticamente dos valores obtidos na condição 2. Nota- se também que os tempos de indução obtidos neste trabalho para os dois tipos de azeite foram maiores do que os encontrados na literatura, indicando que os extratos contendo oleuropeína, obtidos da extração das folhas de oliva em pó realizaram atividade antioxidante sobre as amostras de azeite, aumentando sua estabilidade oxidativa.
Já para as amostras de óleo de girassol, notou-se que os tempos de indução obtidos na presença de extrato de folhas de oliva foram menores do que os obtidos por Scharlack (2015) sem a adição de extrato. De fato, como as amostras de óleo de girassol estavam armazenadas a um certo tempo, desde as análises realizadas por Scharlack (2015), estas podem ter se degradado e o período de indução pode ter diminuído também. Infelizmente, devido à difícil disponibilidade do equipamento Rancimat na época dos experimentos, esta análise na condição 1 não pôde ser refeita para novas amostras de óleo de girassol.
Jorge (2010) realizou análises de estabilidade oxidativa em diferentes marcas de azeites de oliva e encontrou valores dos tempos de indução (em horas), variando de 9,04 à 42,44. Krichene et al. (2010) estudaram a estabilidade oxidativa de azeites de oliva e o comportamento dos seus compostos antioxidantes naturais durante o armazenamento. Os tempos de indução (em horas) das amostras de azeites virgens encontrados pelos autores variaram de 21,3 à 43,5.
Em um trabalho publicado por Salta et al. (2007), os autores avaliaram a estabilidade de óleos vegetais enriquecidos com extratos de folhas de oliva, os quais continham cerca de 185 mg de oleuropeína/kg de óleo. Antes da adição dos extratos no azeite de oliva e no óleo de palma, as amostras apresentaram tempos de indução (em horas) de 13,3 e 24 horas, respectivamente. Após o enriquecimento dos óleos com os extratos, os mesmos obtiveram estabilidade de 20,8 e 43,1 horas, respectivamente, confirmando que a adição dos extratos de folhas de oliva em óleos vegetais contribui para o aumento de sua estabilidade oxidativa.
Jimenez et al. (2011) reportaram resultados de estabilidade oxidativa em óleos de girassol, canola e soja adicionados de três tipos de extratos de folhas de oliva: extrato hidroalcoólico, suco pressionado e extratos obtidos por CO2 supercrítico, sendo que cada uma das amostras de extratos continham uma concentração de polifenóis de 250 e 630 mg CAE/kg de óleo e os resultados de estabilidade oxidativa foram determinados pelo aparelho Rancimat. Para os extratos que continham a concentração de 250 mg CAE/kg de óleo, os tempos de indução (em horas) do óleo de girassol variou de 21,1, 26,3 e 2,7 com os extratos hidroalcoólicos, extrato obtido de CO2 supercrítico e suco pressionado, respectivamente. Para o óleo de canola, na mesma ordem dos extratos, os resultados foram 9,5, 12,6 e 1,8. Para o óleo de soja, tempos de indução de 6,7, 6,9 e 1,7 foram encontrados na mesma ordem dos extratos
descrita acima. Os autores avaliaram também a concentração de polifenóis de 630 mg CAE/kg de óleo em cada um dos óleos. O óleo de girassol com extrato hidroalcoólico, CO2 supercrítico e suco pressionado obteve tempos de indução variando de 30,7, 35,1 e 3,0. O óleo de canola, 11,0, 13,4 e 2,0 e para o óleo de soja, tempos de 7,6, 8,4 e 1,4, respectivamente para a ordem dos extratos citadas.
Adicionalmente aos experimentos descritos anteriormente, também foram realizados testes de estabilidade oxidativa através da adição direta de folhas de oliva em pó, para se verificar se as folhas puras também exerciam atividade antioxidante sobre os azeites. Para o azeite extra-virgem, o tempo de indução obtido com a adição de uma massa conhecida de folha em pó foi de (24,81 ± 0,15) h, e com o dobro da massa foi de (24,39 ± 0,37) h. Comparando-se esses valores com o tempo de indução para a amostra pura (Tabela 9), que foi de (24,22 ± 0,41) h, verificou-se que não diferiram estatisticamente entre si, indicando que a adição da folha em pó não aumentou a estabilidade oxidativa do azeite extra-virgem. Já para o azeite comum, a adição de uma massa conhecida de folha em pó resultou em um aumento do tempo de indução para (16,66 ± 0,08) h, e com o dobro da massa de folha, o valor foi de (15,98 ± 0,65) h. Ambos não diferiram entre si, mas diferiram estatisticamente e foram maiores do que o valor obtido para o azeite comum puro (Tabela 9), que foi de (14,26 ± 0,32) h.
A Figura 17 apresenta uma comparação entre os tempos de indução obtidos para os azeites extra-virgem e comum nas três condições: puros, com a adição de extrato ou folhas em pó, com o dobro de extrato ou folhas em pó.
Figura 17: Comparação da adição de extrato e de folhas de oliva aos azeites.
Fonte: Própria autoria.
Pela Figura 17, nota-se que as amostras de azeite extra-virgem adicionadas de extrato diferiram estatisticamente de todas as outras amostras, apresentando maior estabilidade (tempo de indução igual a 27,15 horas) em relação às amostras onde foram adicionadas as folhas em pó. Já para o azeite comum, a diferença entre os tempos de indução com a adição de extrato e com a adição de folhas não foi significativa, mas estes foram diferentes estatisticamente das amostras com o dobro de folhas e do azeite puro.
Os resultados expressos neste trabalho indicaram que a adição de extrato de folhas de oliva em óleos pode ser positiva para o aumento da estabilidade oxidativa de azeite de oliva, porém, é necessário um estudo mais aprofundado acerca das condições de contato entre os óleos e o extrato, por exemplo.
0 5 10 15 20 25 30 Extra-virgem Comum T em po d e in du çã o (h ora s)
Amostras de azeites de oliva
Puro Com extrato Dobro extrato Com folhas Dobro folhas