En internasjonal konflikt

Na avaliação da sazonalidade do crescimento em altura e diâmetro do tronco e da atividade cambial das árvores de eucalipto foram aplicados os métodos dinâmico (com faixas dendrométricas) e estático (com a extração de amostras do lenho).

4.3.1 Crescimento em altura e incremento em diâmetro do tronco das árvores A avaliação do crescimento em altura do tronco das árvores de eucalipto foi realizada a partir dos seis meses de idade, mensurando-se a altura total por meio de régua graduada de todas as plantas da área útil das subparcelas.

Na avaliação do incremento em diâmetro do tronco foram instalados dendrômetros de aço no DAP do tronco de três árvores/subparcela, sendo nove árvores com dendrômetros/tratamento, constituindo-se em um total de 54 árvores, avaliadas em um delineamento de blocos casualizados. As árvores selecionadas para a instalação dos dendrômetros localizavam-se na primeira linha da parcela útil, sendo intercaladas entre si, representando o tratamento aplicado nas 36 árvores centrais.

(Setembro/2010 )

As faixas dendrométricas de aço foram confeccionadas segundo metodologia descrita por Botosso e Tomazello Filho (2001), utilizando-se fitas de aço inoxidável (12,7x0,15 mm, largura e espessura), com escala em mm e nônio, com precisão de 0,2 mm, mantidas sob tração por uma mola de aço inoxidável (100 x 8 mm, comprimento e diâmetro) (Figura 7A e D) no tronco das árvores. Para a obtenção do comprimento total das faixas dendrométricas determinou-se, previamente, a circunferência no DAP do tronco das árvores, incluindo-se + 17 cm (referentes à sobreposição da escala e do nônio). As graduações da escala de nônio foram demarcadas na fita de aço, através de gabarito (Figura 7B e C), com duas placas metálicas: (i) a primeira, na borda inferior, com escala de leitura de graduação de 80 mm e (ii) a segunda, na borda superior, com escala de 10 divisões do nônio.

Figura 7 - Faixa dendrométrica no tronco de árvore (A), sobreposição da escala-nônio (B), gabarito para gravação da escala-nônio (C), dendrômetro e escala/mola (D) (SETTE JR., 2010, adap.)

Para a avaliação do incremento em diâmetro do tronco das árvores foi mensurado o deslocamento das escalas sobrepostas das faixas dendrométricas mensalmente, no início de cada mês, no período da manhã (8:00-10:00h) e mesmo trajeto. Os dados da mensuração dos dendrômetros no tronco das árvores foram registrados no período de novembro de 2011 a novembro de 2013, correspondendo ao 18o e 43o mês de plantio, respectivamente; no período de dezembro de 2012 a novembro de 2013 as leituras dos dendrômetros foram realizadas semanalmente, de modo a obter uma maior precisão temporal da influência das variáveis climáticas sobre o incremento do tronco das árvores.

A B

C

4.3.2 Sazonalidade da atividade cambial do tronco das árvores

Selecionou-se uma árvore de cada um dos seis tratamentos nos três blocos para a análise da sazonalidade da atividade cambial, totalizando dezoito árvores analisadas. No tronco das árvores selecionadas foram extraídas amostras do lenho no mesmo dia da leitura dos dendrômetros (frequência mensal): pela manhã, entre 10:00-12:00 h, no período de um ano, entre os meses de outubro de 2011 a setembro de 2012.

Com base nos dados de incremento em diâmetro do tronco pelos dendrômetros foi definido o período de maior e menor atividade cambial e sua relação com a precipitação e temperatura média. Utilizou-se o instrumento Trephor (Figura 8) para a coleta das amostras, contendo casca, floema, câmbio e xilema, que se apresentavam com formato cilíndrico, 2,5 mm de diâmetro e 20 mm de comprimento, para a análise da atividade cambial (ROSSI et al., 2006).

As amostras do lenho foram, inicialmente, extraídas na altura de 50 cm do tronco, em duplicata, distanciadas 5 cm ao longo do caule, na seção transversal; posteriormente, as amostras do lenho foram extraídas de posições espiradas ao longo do tronco, distanciadas de 5-10 cm da coleta anterior. As amostras do lenho foram armazenadas em recipientes fechados, com solução fixadora de FAA (formaldeído, ácido acético, álcool etílico, água destilada, nas proporções de 10:5:50:35) (BERLYN; MIKSCHE, 1976) e mantidas sob refrigeração (8 -10 °C) até o “emblocamento”.

Figura 8 – Extração da amostra do lenho do tronco de uma árvore de eucalipto com o extrator Trephor

A inclusão das amostras do lenho, fixadas em FAA, envolveu as seguintes etapas: (i) lavagem em água corrente (8-12 horas); (ii) de acordo com a metodologia proposta por De Magistris et al. (2000), utilizando o polietilenoglicol (PEG, peso molecular 1500), realizou-se a embebição das amostras do lenho em PEG 20%, em

estufa de circulação forçada (36 h, 60o_{C), para a sua impregnação; em seguida,}

transferiram-se as amostras para o PEG 60% (24 h, 60ºC) e, finalmente, para o PEG 100% (24 h, 60ºC).

As amostras do lenho foram orientadas no direção transversal, embebidas em PEG 100%, em estado líquido, solidificando-se à temperatura ambiente, formando um bloco; posteriormente, o bloco foi colado com adesivo, à base de éster de cianoacrilato, em blocos de madeira (1 x 2 x 0,5 cm) para fixá-lo no suporte do micrótomo de deslize. Na superfície transversal da amostra do lenho, aplicou-se uma camada de polivinila cloreto (PVC) para a sua plastificação, a fim de facilitar o corte com a espessura de 10 µm.

Os cortes histológicos foram colocados em água e, em seguida, corados, de acordo com metodologia proposta por Tolivia e Tolivia (1987), durante 5 a 10 minutos, com safranina e azul de astra (safrablau, 7 partes de azul de astra 1% aquoso + 3 de safranina 1% aquoso), que propiciou coloração vermelho intenso (tecidos lignificados, xilema), azul (tecidos não lignificados) e cores intermediárias (tecidos em processo de lignificação). Os cortes histológicos foram lavados (água destilada, retirada excesso de corante), desidratados (álcool 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 100%) e montados em lâmina com Entellan® + acetetato de butila.

Na análise da sazonalidade da atividade cambial avaliaram-se as lâminas histológicas do lenho das árvores de eucalipto sob microscopia de luz. Utilizou-se o software “Image ProPlus” para determinação de: (i) número e largura da camada de células da camada cambial e (ii) número e comprimento da camada de células do xilema recém-diferenciadas (sem a formação da parede secundária).

No presente trabalho, utilizou-se o termo “câmbio vascular”, considerando a camada de células iniciais juntamente com as camadas de células derivadas. Tal situação se deve à impossibilidade de separação das duas camadas de células, além da falta de alinhamento das células iniciais.

As etapas da análise da sazonalidade da atividade cambial do tronco das árvores envolveram as etapas metodológicas (Figuras 9 e 10) com a análise e interpretação, relacionadas com a leitura dos dendrômetros e variáveis climáticas.

Figura 9 - Metodologia da análise da atividade cambial do tronco das árvores

Figura 10 - Etapas da análise da atividade cambial: (A) amostra em solução de FAA; (B) amostra emblocada em PEG; (C) corte histológico para análise microscópica