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4. Konklusjoner og diskusjon

4.4 Diskusjon

- A imunoexpressão de linfócitos FoxP3+ foi identificada nas biópsias cutâneas tanto dos pacientes portadores de hanseníase quanto dos indivíduos sadios, mostrando-se estatisticamente maior nos portadores da forma virchowiana da hanseníase e da reação hansênica tipo 1 em relação aos indivíduos sadios.

- A imunoexpressão de linfócitos T CD4+ mostrou-se estatisticamente maior nas lesões dos pacientes portadores da forma tuberculoide da hanseníase em relação aos indivíduos sadios, enquanto a imunoexpressão de linfócitos T CD8+ mostrou-se estatisticamente maior nas lesões dos pacientes portadores da forma virchowiana da hanseníase em relação aos indivíduos sadios.

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APÊNDICES

APENDICE A - Termo de Consentimento Livre e Esclarecido

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO

Você está sendo convidado(a) a participar do projeto de pesquisa intitulado “Estudo da expressão imunohistoquímica de linfócitos T-reg CD4+CD25+FoxP3+ e do receptor da interleucina 23 em biópsias cutâneas de pacientes com formas polares de hanseníase e reações hansênicas” que tem por objetivo estudar a expressão imunohistoquímica de linfócitos T-reg CD4+CD25+FoxP3+ e do receptor da interleucina 23 em biópsias cutâneas de pacientes com formas polares de hanseníase e reações hansênicas.

A Hanseníase é uma doença contagiosa causada por uma bactéria chamada Mycobacterium Leprae que é transmitida de uma pessoa para outra pelo ar.

A doença causa manchas na pele, dormência no corpo e sequelas que podem dificultar realização dos movimentos normais. Pode também causar febre e dor no corpo quando ocorrem as reações hansênicas.

As diferentes formas de apresentação da doença dependem do sistema imunológico de cada paciente. Sendo assim, são necessários estudos que avaliem melhor a forma como cada paciente reage à infecção pelo bacilo da hanseníase para tentar prever aqueles que desenvolverão as formas mais graves. Descobertas nesse assunto poderão melhorar o tratamento da hanseníase e prevenir as sequelas da doença.

Após a suspeita do seu diagnóstico de hanseníase, será realizada uma biópsia de pele para realização de testes que permitam avaliar a forma como o sistema imunológico se comporta durante a infecção. A biópsia consiste na retirada de um fragmento pequeno de pele após aplicação de anestesia local. Esse exame é rotineiramente realizado nos pacientes com suspeita de hanseníase e auxilia na confirmação do diagnóstico e na classificação da forma da doença. É um procedimento simples cujos riscos possíveis se restringem ao desenvolvimento de reação alérgica ao anestésico utilizado e aparecimento de pequena cicatriz no local do procedimento.

Você terá acompanhamento regular no Ambulatório de Dermatologia do Hospital Universitário Walter Cantídio e receberá o tratamento oferecido pelo Ministério da Saúde gratuitamente, mesmo que não deseje participar desse estudo.

Você tem a liberdade de retirar seu consentimento a qualquer momento e deixar de participar do estudo, sem prejuízo para seu tratamento.

As informações obtidas serão analisadas em conjunto com as de outros pacientes, não sendo divulgada a identificação de nenhum paciente.

Qualquer dúvida, favor entrar em contato através do número (85) 9223 6182 para falar com a pesquisadora responsável (Dra Daniela Ventin).

Se você tiver alguma consideração ou dúvida sobre a ética da pesquisa, entre em contato com o Comitê de Ética em Pesquisa (CEP) do HUWC – Rua Capitão Francisco Pedro 1290, Rodolfo Teófilo; fone: 3366-8589 – E-mail: [email protected].

Caso você se sinta suficientemente informado a respeito das informações que leu ou que foram lidas para você sobre os propósitos do estudo, os procedimentos a serem realizados, seus desconfortos e riscos, as garantias de confidencialidade e de esclarecimentos permanentes e que sua participação é voluntária, que não há remuneração para participar do estudo e se você concordar em participar solicitamos que assine no espaço abaixo.

Fortaleza, _______ de___________________ de __________. _______________________________________ Assinatura do paciente

APENDICE B – Dados referentes a idade, sexo, índice baciloscópico, quantificação das células CD4+, CD8+ e FoxP3+ dos casos estudados.

CASO SEXO IDADE GRUPO BI CD4 n cel/mm2 CD8 n cel/mm2 FoxP3 n cel/mm2

Caso 1 M 58 MHT 0 - 213,6 103,8 Caso 2 F 47 MHT 0 261,1 378,8 221,3 Caso 3 F 41 MHT 0 384 397,3 176 Caso 4 F 38 MHT 0 - 662,9 592,8 Caso 5 F 48 MHT 0 333,8 1055,4 329,4 Caso 6 F 18 MHT 0 - 67,4 93,7 Caso 7 F 59 MHT 0 498 516,1 161,7 Caso 8 F 42 MHT 0 100,9 - 291,7 Caso 9 M 64 MHT 0 122,6 241,7 72,1 Caso 10 F 65 MHT 0 530 123,5 - Caso 11 F 45 MHT 0 461,7 751,4 252,6 Caso 12 M 27 MHT 0 196,3 195,2 157,6 Caso 13 F 30 MHT 0 406,9 661,4 184,5 Caso 14 F 57 MHT 0 592,6 535,2 209,8 Caso 15 M 65 MHT 0 27 182,7 184,7 Caso 16 M 28 MHV 3,8 268,6 1147 422 Caso 17 M 45 MHV 5,2 - 692,4 463,3 Caso 18 M 60 MHV 2,4 116 784,8 193,8 Caso 19 F 59 MHV 0 255,5 1089 292,7 Caso 20 F 53 MHV 1,6 - - - Caso 21 F 39 MHV 1,6 11,5 498,4 29,7 Caso 22 F 45 MHV 2,6 25 2024,1 286,2 Caso 23 M 26 MHV 2,8 20,5 150,5 199,1 Caso 24 M 57 MHV 1,2 424,1 1129,8 - Caso 25 F 59 MHV 0,6 40,7 716,2 271 Caso 26 F 56 MHV 3,2 264 828,2 420,3 Caso 27 F 73 MHV 3,25 218,5 413,1 - Caso 28 M 75 MHV - 292,5 738,8 390,6 Caso 29 F 30 MHV 2 - 200,6 138 Caso 30 F 68 RR 0,2 888,7 932,1 420,2 Caso 31 M 19 RR 1 31,3 723,7 658,9 Caso 32 M 64 RR 0 - 186,6 183,2 Caso 33 M 74 RR 0 - 311,1 499,1 Caso 34 M 48 RR 0 - 229,2 130,1 Caso 35 M 56 ENH - 349,9 333,8 28 Caso 36 F 70 Controle - 7,8 236,4 141,7

Caso 37 F 18 Controle - 3,5 280,8 218,2 Caso 38 F 46 Controle - - - - Caso 39 F 34 Controle - - - 55,9 Caso 40 F 26 Controle - 39 60,3 67,6 Caso 41 F 38 Controle - 21,8 34,9 0 Caso 42 M 71 Controle - 16,7 24,5 172,1 Caso 43 M 55 Controle - 14,6 87,1 0 Caso 44 M 61 Controle - 59 - 72,4 Caso 45 M 18 Controle - 89,6 307,4 270 Caso 46 M 36 Controle - 15,7 346,8 -

APENDICE C – Dados referentes ao total de lâminas coradas, variação, mediana e média da imunoexpressão para cada anticorpo, discriminados por grupo de estudo.

GRUPO MHT MHV RR ENH CONTROLE

MÉDIA DE IDADE (±14,58) 46,93 (±15,53) 50,35 (±22,10) 54,60 56 (±19,19) 43,00 N CASOS CD4 12 11 2 1 9 N CASOS CD8 14 13 5 1 8 N CASOS FOXP3 14 11 5 1 9 VARIAÇÃO CD4 27 -592,6 11,5 - 424,1 31,3 - 888,7 349,9 3,5 - 89,6 MEDIANA CD4 358,9 218,5 - - 16,7 MÉDIA CD4 326,2 176,0 - - 29,7 VARIAÇÃO CD8 67,4 - 1055,4 150,5- 2024,1 186,6 - 932,1 - 24,5 - 346,8 MEDIANA CD8 388,05 738,8 311,1 - 161,75 MÉDIA CD8 427,3 800,1 476,5 - 172,3 VARIAÇÃO FOXP3 72,1 - 592,8 29,7 - 463,3 130,1 - 658,9 - 0 - 270 MEDIANA FOXP3 184,6 286,2 420,2 - 72,4 MÉDIA FOXP3 216,5 282,4 378,3 - 110,9

ANEXOS

ANEXO A – Carta de aprovação do Comitê de Ética.

UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ HOSPITAL UNIVERSITÁRIO WALTER CANTÍDIO

COMITÊ DE ÉTICA EM PESQUISA

Rua Capitão Francisco Pedro, 1290 – Rodolfo Teófilo – 60.430.370 – Fortaleza-Ce FONE: (85) 3366-8589/ 3366 8613 E-MAIL: [email protected]

Protocolo no: 079.07.11 (2)

Pesquisador(a) Responsável: Daniela Ventin Prates Rezende Departamento/ Serviço:

Título do Projeto: “Estudo da expressão imunohistoquímica de linfócitos T-reg CD4+CD25+FoxP3+ e do receptor da interleucina 23 em biópsias cutâneas de pacientes com formas polares de hanseníase e reações hansênicas.”

O Comitê de Ética em Pesquisa do Hospital Universitário Walter Cantídio analisou o projeto de pesquisa supracitado e em tendo sido atendidas as pendências baseando-se nas normas que regulamentam a pesquisa em seres humanos, do Conselho Nacional de Saúde (Resoluções CNS 196/96, 251/97, 292/99, 303/00, 304/00, 347/05, 346/05), resolveu classificá-lo como: APROVADO.

Salientamos a necessidade de apresentação de relatório ao CEP-HUWC da pesquisa dentro de 12 meses (data prevista: 30/08/12).

Fortaleza, 30 de agosto de 2011.

Dra. Maria de Fátima de Souza Coordenadora do CEP - HUWC

ANEXO B – Carta de aprovação do Comitê de Ética em relação à utilização de biópsias de pele armazenadas no Departamento de Patologia e Medicina Legal.

UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ HOSPITAL UNIVERSITÁRIO WALTER CANTÍDIO

COMITÊ DE ÉTICA EM PESQUISA

Rua Capitão Francisco Pedro, 1290 – Rodolfo Teófilo – 60.430.370 – Fortaleza-Ce FONE: (85) 3366-8589/ 3366 8613 E-MAIL: [email protected]

Protocolo no: 079.07.11

Pesquisador(a) Responsável: Daniela Ventin Prates Rezende Departamento/ Serviço:

Título do Projeto: “Estudo da expressão imunohistoquímica de linfócitos T-reg CD4+CD25+FoxP3+ e do receptor da interleucina 23 em biópsias cutâneas de pacientes com formas polares de hanseníase e reações hansênicas.”

O Comitê de Ética em Pesquisa do Hospital Universitário Walter Cantídio aprovou, na sessão do dia 05/11/2012, os seguintes documentos relativos ao projeto acima epigrafado: Adendo solicitando utilizar biópsias antigas; Novo cronograma e Termo de Fiel Depositário.

Fortaleza, 06 de novembro de 2012.

Dra. Maria de Fátima de Souza Coordenadora do CEP - HUWC