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China considered an increasing concern

Ceriodaphnia silvestrii

Ao contrário do que ocorreu nos testes de toxicidade aguda, as concentrações de Cd nas amostras de água iniciais e finais dos testes de toxicidade crônica tenderam a diminuir com o decorrer dos testes. As concentrações mais elevadas foram verificadas em Sed 0,5% (19,53 e 15,39 µg.L-1) e as mais baixas foram em Sed 0% (5,69 e 0 µg.L-1). Quanto ao sedimento, as concentrações de Cd biodisponivel aumentaram ao longo do teste, ao contrário do que ocorreu nos testes agudos. As concentrações foram semelhantes em todos os sedimentos, mesmo com a variação das concentração de matéria orgânica (Figura 4.13).

Figura 4.12: Concentração de Cd na água (A) e sedimento (B) ao início e final dos testes de

toxicidade crônica com C. silvestrii nos diferentes tipos de sedimento sintético fortificados com 0,6mg.Kg-1 de Cd.

Nos testes de toxicidade crônica com sedimentos fortificados com Cd, a sobrevivência dos organismos foi afetada em todos os sedimentos. A concentração de 0,6 mg.Kg-1 de Cd nos sedimentos, independente da concentração de matéria orgânica, causou efeitos severos na sobrevivência dos organismos (Tabela 4.7). Em função do comprometimento da sobrevivência, não foi possível avaliar a reprodução dos organismos.

Tabela 4.7: Sobrevivência média de C. silvestrii expostos aos sedimentos sintéticos sem

fortificação e fortificados com 0,6mg.Kg-1 de Cd. Porcentagem média de sobrevivência (±

DP). Células destacadas indicam diferença significativa entre os tratamentos sem fortificação e fortificados com Cd, e o valor de p da análise estatística de Fisher ( 0,05).

Amostra Sem fortificação Fortificado com Cd

Controle 96,7% (±5,8) - Controle X Sed 0% 90,0% (±10,0) 20,0% (±17,3) (p=0,0000) Controle X Sed 0,25% 96,7% (±5,8) 0% (±0) (p=0,0000) Controle X Sed 0,5% 93,3% (±11,5) 0% (±0) (p=0,0000) Controle X Sed 1% 100,0% (± 0) 0% (± 0) (p=0,0000) Chironomus xanthus

As concentrações de Cd nas amostras de água dos testes de toxicidade crônica com C. xanthus decresceram com o decorrer dos testes, assim como para C. silvestrii. No início dos testes, as concentrações variaram entre 11,48 (Sed 0,5%) e 14,6 mg.L-1 (Sed 0%) e, ao final, entre 0,1 (Sed 0,25%) e 9,3 mg.L-1 (Sed 1%). As concentrações de Cd biodisponível nos sedimentos também apresentaram uma tendência à queda ao longo dos testes, entre 2,43 (Sed 0,25%) e 4,03 mg.Kg-1 (Sed 1%) no início dos testes e 2,42 (Sed 0%) e 2,85 mg.Kg-1 (Sed 1%) ao final (Figura 4.14).

Figura 4.13: Concentração de Cd na água (A) e sedimento (B) ao início e final dos testes de

toxicidade crônica com C. xanthus nos diferentes tipos de sedimento sintético fortificados com 0,6mg.Kg-1 de Cd.

A sobrevivência média dos organismos nos testes de toxicidade crônica expostos aos sedimentos fortificados com Cd foi significativamente menor que nos testes com sedimento sintético sem fortificação. A sobrevivência foi menor no Sed 1%, em média, 28,3%, indicando uma maior toxicidade do metal com o aumento da MO (Tabela 4.8).

Tabela 4.8: Sobrevivência média de C. xanthus expostos aos sedimentos sintéticos sem

fortificação e fortificados com 0,6mg.Kg-1 de Cd. Porcentagem média de sobrevivência (±

DP). Células destacadas indicam diferença significativa entre os tratamentos sem fortificação e fortificados com Cd, e o valor de p da análise estatística de Fisher ( 0,05).

Amostra Sem fortificação Fortificado com Cd

Controle (Areia) 88,9% (±10,5) -

Sed 0% 87,8% (±14,8) 42,2% (± 37,8) (p=0,0000) Sed 0,25% 94,5% (±10,1) 30,5% (± 45,8) (p=0,0000) Sed 0,5% 95,6% (±7,2) 36,7% (± 33,3) (p=0,0000) Sed 1% 87,8%(±10,5) 28,3% (± 30,1) (p=0,0000)

A avaliação da biomassa seca indicou diferença significativa entre os grupos dos organismos expostos nos sedimentos sem fortificação e fortificados com Cd pela análise de Mann-Whitney, com valor de p=0,0105 ( 0,05) (Tabela 4.9).

Tabela 4.1: Biomassa seca média final de C. xanthus expostos aos sedimentos formulados

sem fortificação e fortificados com 0,6mg.Kg-1 de cádmio. Valores expressos em mg.

Amostra Sem fortificação Fortificado com Cd

Controle (Areia) 0,324 -

Sed 0% 0,465 0,191

Sed 0,25% 0,775 0,182

Sed 0,5% 0,741 0,115

Sed 1% 0,362 0,072

A morfologia de mento de C. xanthus expostos aos sedimentos fortificados com Cd revelou ausência de dentes em organismos expostos em Sed 0 e 1% em,

aproximadamente, 4 e 6% dos organismos, respectivamente. A porcentagem de alterações dos organismos expostos ao Sed 1% fortificado está significativamente maior em relação aos sedimentos sem fortificação pelo estatística de Fisher (p = 0,0145 (Figura 4.15).

Figura 4.14: Exemplares de C. xanthus expostos em sedimentos sintéticos fortificados com

Cd. A. Sed 0%. Notar o tamanho visivelmente menor da cápsula cefálica e ausência de dentes. B. Sed 1%. Cápsula cefálica ligeiramente maior que do Sed 0%, porém ainda menor que dos organismos mantidos nos sedimentos sem fortificação.

A concentração de metal nos tecidos de C. xanthus expostos aos sedimentos fortificados com 0,6mg.Kg-1 de cádmio foi realizada somente em TC3 em função da reduzida sobrevivência dos organismos nos demais ensaios, resultando em massa insuficiente para a análise. Todos os organismos expostos aos sedimentos fortificados apresentaram concentrações de cádmio muito acima do encontrado nos organismos expostos aos sedimentos não fortificados (Tabela 4.10). A análise estatística de Mann-Whitney mostrou diferença significativa entre as concentrações de Cd nos organismos expostos aos sedimentos sem fortificação e fortificados com Cd (p=0,0209, 0,05).

Tabela 4.2: Concentração de Cd nos organismos de C. xanthus expostos aos sedimentos

sintéticos não fortificados e fortificados com 0,6mg.Kg-1 de Cd. Valores expressos em µg.g-1

de peso seco.

Amostra Sem Fortificação Fortificado

Sed 0% 4,47 294,84

Sed 0,25% 1,15 323,55

Sed 0,5% 11,79 232,42

Sed 1% 34,24 557,00

Danio rerio

Ao contrário do que ocorreu com as outras espécies, a concentração de Cd nas amostras de água dos testes de toxicidade crônica com D. rerio aumentou ao longo dos testes. Ao início, as concentrações variaram entre 2,36 (Sed 0,5%) e 7,46 mg.L-1 (Sed 1%), enquanto que, ao final dos testes, entre 24,86 (Sed 0,5%) e 42,39 mg.L-1 (Sed 0,25%). As concentrações de Cd biodisponível no sedimento, assim como para C. silvestrii, aumentaram com o decorrer dos testes. As concentrações ao início dos testes foram bastante semelhantes, entre 0,24 (Sed 0,25%) e 0,40 mg.Kg-1 (Sed 1%). Ao final dos mesmos, as concentrações foram maiores nos sedimentos com maior teor orgânico, de 0,97 (Sed 1%) e 1,2 mg.Kg-1 (Sed 0,5%) (Figura 4.16).

Figura 4.15: Concentração de Cd na água (A) e sedimento (B) ao início e final dos testes de

toxicidade crônica com D. rerio nos diferentes tipos de sedimento sintético fortificados com 0,6mg.Kg-1 de Cd.

A sobrevivência média dos organismos nos testes de toxicidade crônica- parcial com sedimentos fortificados com Cd variou entre 53,3% (Sed 1%) e 95% (Sed 0,5%), sendo possível verificar diferenças significativas apenas em Sed 1% em relação ao Controle (Tabela 4.11). Com relação ao crescimento dos organismos, foi possível detectar diferenças significativas no comprimento padrão e no peso dos organismos no segundo teste crônico (TC2), no Sed 0,25% (Tabela 2 – Apêndice C).

Tabela 4.3: Sobrevivência média de D. rerio expostos aos sedimentos sintéticos sem

fortificação e fortificados com 0,6mg.Kg-1 de Cd. Porcentagem média de sobrevivência (±

DP). Células destacadas indicam diferença significativa entre os tratamentos sem fortificação e fortificados com Cd, e o valor de p da análise estatística de Fisher ( 0,05).

Amostra Sem fortificação Fortificado com Cd

Controle 100% (± 0) -

Sed 0% 100% (± 0) 84,2% (± 15,3) (p=0,1100) Sed 0,25% 100% (± 0) 90,0% (± 14,1) (p=0,3728) Sed 0,5% 100% (± 0) 95,0% (± 7,1) (p=0,4643)

Sed 1% 100% (± 0) 53,3% (± 66,0) (p=0,0000)

Os resultados da análise da morfologia das brânquias possibilitaram observar a presença de alterações de primeiro estágio em todos os organismos analisados expostos em todos os tratamentos. Alterações como: hiperplasia, fusão de lamelas

secundárias, deslocamento no epitélio das lamelas secundárias e dilatação em capilares sanguíneos. A hiperplasia foi mais intensa em Sed 0% do que nos sedimentos que apresentavam teores de matéria orgânica (Figura 4.17).

Figura 4.16: Cortes longitudinais ao filamento braquial de juvenis de D. rerio expostos nos

testes com sedimentos sintéticos fortificados com Cd. A e B. Sed 0%. C. Sed 0,25%. D. Sed 0,5%. E. Sed 1%.Verificar a proliferação de células entre as lamelas (X), dilatação de capilares e espessamento de lamelas secundárias (D). Coloração: HE.

A análise de Cd nos tecidos dos organismos expostos em sedimentos fortificados permitiu verificar uma tendência dos mesmos em concentrar o metal nos tecidos, uma vez que os valores estiveram muito acima daqueles encontrados nos organismos expostos aos sedimentos sem contaminação, bem como na concentração inicialmente adicionada aos sedimentos (Tabela 4.12). A análise estatística de Mann-Whitney mostrou diferença significativa entre as concentrações

de Cd nos organismos expostos aos sedimentos sem fortificação e fortificados com Cd (p=0,0105, 0,05).

Tabela 4.4: Concentração de Cd nos organismos de D. rerio expostos aos sedimentos

sintéticos não fortificados e fortificados com 0,6mg.Kg-1 de Cd. Valores expressos em µg.g-1

de peso seco.

Amostra Sem Fortificação Fortificado

Sed 0% 19,46 2522,34

Sed 0,25% 11,53 5109,51

Sed 0,5% 28,24 3878,59

Sed 1% 22,05 3021,54