rapp_notat_BKO_8805.pdf (494Kb)

(1)

"Bruk av kjølevann til oppdrett av piggvar"

HALOGENERTE ORGANISKE FORBINDELSER

PIGGVAR.

FRA FORSØKSKAR MED SJØVANN KLORERT VED HJELP AV ELEKTROLYSE OG DEKLORERT MED NATRIUMBISULFITT

RAPPORT Nr. 3

Analyse av piggvar fra Statoil, s gassterminal på Kårstø

av

Karsten H. Palmork og Svein Wilhelmsen

Fiskeridirektoratets Havforskningsinstitutt Nordnesparken 2, N-5024 Bergen

November 1988

(2)

Rapportens tittel:

HALOGENERTE ORGAN l SKE FORB l NDELSER l PIGGVAR

FRA FORSØK MED SJØVANN KLORERT VED HJELP AV ELEKTROL VSE OG DEKLORERT MED NATRI UMBISULFITT.

RAPPORT Nr. 3

F orfaHere/Saksbehandlere Avdeling:

K. H. P a lmork og S. Yilhe l ms en Biologisk og Kjemisk Oseanografi

Prosjekt Nr.: BKO 8805 under

Oppdragsgiver ref.: 0012-0000- 290/P .5.8.3.

Avdeling for Akvakultur Ansvarlig: Karsten H. P a lmork

Sammendrag: Prøver samlet inn ¹⁵oktober ¹⁹⁸⁸er analysert med hensyn p8 halogenerte forbindelser. Det er foretatt analyser av klorert sjøvann og isolert ca.

20 halogenerte forbindelser. Etter dekloreri ng med natri umbisulfitt har det g8tt piggvar i forsøks- og kontroll kar. Prøver av lever og muskel er analysert ved hjel p av gasskromatografi og gasskromatografi /massespektrometri.

Resultatet av denne undersøkelsen er at det er isolert tre komponenter, men bare en av disse er i s8 stor konsentrasjon at det er mulig 8 identifisere den. dette er gjort, det er bromoform, CHBr3. M8li ng av akkumulering og el i mi ne ring av denne forbindelsen i fisk m8 være neste steg i prosjektet. Giftigheten av stoffet m8 ogs8 fastsl8es.

Forsøket startet 18. mai 1988.

Stikkord:

Akvakultur, Piggvar, Kjølevann Kjemisk analyse av organohalogener

Sendt til:

Forskningssjef Grim Berge, Biblioteket Forskningssjef Snorre Tilseth, T. Kleppe Direktør O. Nakken, l. Rønnestad, l. Huse.

(3)

1

Innledning.

Under et møte i april d.å. ble det lagt planer for videre arbeid i prosjektet: "Bruk av kjølevann til oppdrett av piggvar" ved Gassterminalen på Kårstø. Første prøveinnsamling av sjøvann etter elektrolyse ble foretatt 18. og 19. mai. Den 15. oktober 1988 ble det tatt prøver av muskel og lever fra fisk i kontrollkar og forsøkskar på Kårstø. Disse prøvene skulle også benyttes til organoleptisk analyse (smaksprøve). Denne rapporten beskriver prøvetagning, analyse og forsøk på identifisering av halogenerte organiske forbindelser i forsøksfisken.

Prøvetagning.

Det ble tatt fem lever og fem muskelprøver av piggvar fra kontrollkar (K_{1 • 5 )} og forsøkskar (F_{1. 5 ),} Denne fisken skulle også benyttes til organoleptisk analyse på Sentrallaboratoriet.

Prøve opparbeidelse.

Leverprøvene (ca. 2.5 gr.) ble homogenisert med 20 ml. pentan inneholdende 1 O % diklormetan v.h.a. en Ultra Turrax. Etter at de faste partiklene var sunket til bunns, ble 8 ml. pentan-ekstrakt vasket med 2 ml. konsentrert svovelsyre for å fjerne fettet. Pentan- fasen ble inndampet og løst i 100 ~1. hexan.

Muskelprøvene (ca.1 O g.) ble tilsatt 20 g. vannfri natriumsulfat og 50 ml. pentan inneholdende 1 O % diklormetan.Det hele ble homogenisert v.h.a. en hurtigmixer og behandlet videre som beskrevet for leverprøvene.

(4)

(etter biblioteksøk).

Topp Navn nr.

1 + 2 Bromoform

4 1, 1-diklorocyklopentan 6 1-bromo-2-klorocyklopentan 7 1-bromo-2-klorocyklopentan 8 1-bromo-2-klorocyklopentan 9 2,3-dikloro-2-metylpropanal 1 O 2,3-dikloro-2-metylpropanal 11 1-bromo-2-klorocyklopentan 1 2 1-bromo-2-klorocyklopentan 1 4 1-bromo-2-klorocyklopentan

Proba- bility 93 25 50 46 60 32 32 30 34 36

Molekyl- vekt 250 138 182 82 182 140 140 182 182 182

Prøvene ble analysert på gasskromatograf utstyrt med "electron capture" detektor. Det ble også foretatt analyse v.h.a.

gasskromatograf/masses pek trometer ved negativ kjemisk ionisasjon (negativ i o ne dekteksjon). lnstrumentbetingelsene er beskrevet i tabell 11.

Tabell 11. lnstrumentbetingelser under GC/MS analysen.

Computer

Massespektrometer Gasskromatograf Bære gass

Kolonne

Ovn temp. prog.

Ionisasjon 1 Sean range Ionisasjon 2 Sean range

:HP-1 OOOE :HP-5987A :HP-5880A

:Helium, 40 cm/sek.

:Fus ed silica, SE-54, CB, 25 m x 0,32 mm, O, 17 11m :5 min. 40

oc -

6 °C/min - 260

oc

:Eiectron lmpact, 70 eV :40 - 400 am u.

:Chemical lonisation, metan som reaksjonsgass.

:30 - 300 amu.

(5)

a

3527.8 2584.8 1641.7 698.7

3409.3 b 2498.0

675.3

3

2

-235. 99=:==:::::=:::::::=-::=======~=========::::::::;:==:::::::.========--====:;

5.00 6.87 8. 75 10.62 12.50 14.37 16.25 18.12 20.00

Figur 1. ECO kromatogram av a) forsøksfisk og b) kontrollfisk.

File >SW60i i72.7-173.7 emu, KARSTO PIGGVAR F-3(1 File >SW601 KARSTO PIGGVAR F-3 (13) LE 8pk Ab 1632

1600 173

l 1600

l

1200

a ¹²⁰⁰ ⁱ

800 ^400~^~ ⁸⁰⁰⁴⁰⁰ ¹⁶⁰""'-..

~

₂₁₇ ²⁵²_l

OJ

..

^.1.

^...

Î.l^_.lj^J.^.l. ûLL o ^{,-44- ,}ÎlL ' ' ' ^l ^di

2 4 6 8 10 160 200 240

File >SW602 172.7-173.7 emu.8ROMOFORM 1 MG/ ML File >SW602 BROMOFORM 1 MG/ ML 8pk Ab 47544

50000 1

173

40000 ^l

l

40000

l

30000

b

20000

~.'.'.J

20000

10000 254

213 _l ,11,/ '

o o -rr~

2 4 6 8 10 160 200 240

- - · - - --- - ·-· ~- --···----. ^---- ·----- ---^--- ^--- ^'--· ·--

se an 154 2.38 m1n. :

i

l

·,

282 :

(

i

280 Sean 151 ⁱ 2.34 min.

l l

' !

l

259

-

/

280 l

_ j

Figur 2. Kromatogram og massespektre, a) forsøksfisk og b) bromoform.

(6)

Injeksjon

RESULTATER.

Splitless, 2 Ill.

Kromatogrammene

av

forsøksfisk viser tre topper som kontrollfis- ken ikke har (Fig. 1). Massespektra

av

disse toppene (negativ ion deteksjon) viser at toppene 1 og 2 inneholder brom. Topp 2 er langt den største toppen og den er sannsynligvis bromform, (CHBrs, kokepkt. 150°C, molekylvekt: 250). Identiteten

av

denne toppen ble verifisert ved å analysere ren bromoform under samme betingelser.

Retensjonstidene og massespektra (electron impact) viser god overensstemmelse, så identiteten

av

toppen er ganske sikker, (Fig.2). De to andre

Tabell IV, Konsentrasjon, i j.Lg/g fett, av bromoform muskel og

Prøve nr.

F -1 F-2 F-3 F-4 F-5 K- 1 K-2 K-3 K-4 K-5

lever av piggvar.

Lever 1. 7 2.9

4.0 0.2 2.8

muskel 8.6 7.2 8.8 7.8 7.4

(7)

5

toppene er tilstede i så små mengder at identifisering ikke er mulig.

Konsentrasjonen av bromoform i fiskeprøvene er gitt i tabell IV.

Analysene ved hjelp av GC/MS med negativ kjemisk ionisasjon (Cl) av ekstrakt av klorert sjøvann ved naturlig pH viste ca 20 komponenter. Dette kan da ikke være komponenter som akkumuleres i vesentlig grad i fiskemuskel eller lever.

Det som må gjøres nå, er å se hvor lang tid det tar før bromoform blir vasket ut eller nedbrudt i fiskemuskel og i lever.