Na determinação do nitrito não houve diferença significativa entre os grupos experimentais (figura 31), ou seja, os níveis desse marcador foram estatisticamente os mesmos em todos os grupos estudados, o que revela a
inexistência do dano hepático após o desequilíbrio redox causado nos animais pela indução de forma aguda. É possível que essa indução não tenha sido suficiente para alterar o parâmetro analisado, pois as células do fígado possuem uma série de mecanismos compensatórios para lidar com espécies reativas (HALLIWELL; GUTTERIDGE, 1984; HIRAGANAHALLI et al., 2012). Assim, faz-se necessário avaliar o efeito subcrônico do estresse oxidativo induzido pelo AAPH no modelo testado, a fim de comprovar a eficácia da proteção antioxidante conferida pelos PSG.
Figura 31 – Determinação de nitrito no tecido hepático
Ratos foram tratados com salina (controle) e PSG (3 e 10 mg/Kg) 30 minutos antes da administração de AAPH (40 mg/Kg). O grupo controle recebeu apenas salina. Dados são expressos como média ± E.P.M (n= 6 animais). (P <0,05). Teste ANOVA One-Way.
Nitrito
Salina - 3 10 0 100 200 300 400 PSG (mg/kg) AAPH (40 mg/kg) Ni tr it o ( m M /m g p tn )5.4.4 Determinação do conteúdo de tiol
Como pode-se observar na figura 32, não há diferença estatística na determinação do conteúdo de tiol, indicando que não houve alterações no dano oxidativo proteico dos animais suplementados com AAPH. Acredita-se que isso
esteja relacionado à indução aguda do estresse oxidativo. Como relata Passali et al. (2015), o nível de tiol pode ser um marcador final, em vez de um marcador precoce, do processo de estresse oxidativo. O resultado obtido é semelhante ao encontrado na avaliação do estresse oxidativo através da determinação do nitrito, o que contribui para a compreensão da resistência das células hepáticas, embora outros tecidos possam apresentar resultados diferentes, ao dano oxidativo e reforça a necessidade de um protocolo de indução ao estresse oxidativo sub-crônico no tecido hepático.
Figura 32 – Conteúdo de tiol protéico no tecido hepático
Ratos foram tratados com salina (controle) e PSG (3 e 10 mg/Kg) 30 minutos antes da administração de AAPH (40 mg/Kg). O grupo controle recebeu apenas salina. Dados são expressos como média ± E.P.M (n= 6 animais). (P <0,05). Teste ANOVA One-Way.
TIOL
Salina - 3 10 0 10 20 30 40 PSG (mg/kg) AAPH (40 mg/kg) S H (m M o l/m g p tn )6 CONCLUSÃO
A extração enzimática dos polissacarídeos sulfatados totais mostrou ser um método bastante eficiente, pois os PSG obtidos apresentaram alto rendimento. As análises químicas revelaram a presença de 85% de açúcares totais e baixa contaminação proteica na amostra analisada. Foi possível verificar também baixa sulfatação na estrutura química dos PSG. Através de métodos espectroscópicos, os polissacarídeos sulfatados da alga marinha Gracilaria caudata foram identificados como sendo galactana tipo ágar com peso molecular médio de 116,51 kDa.
Os PSG apresentaram efeito antioxidante significativo para todas as atividades antioxidantes in vitro testadas. Baseado nos resultados da atividade antioxidante in vivo, pode-se dizer que os PSG exibiram um efeito de melhora no desequilíbrio redox em ratos, porém esse estresse oxidativo causado pelo AAPH foi insuficiente para gerar dano no tecido hepático. Assim, pesquisas posteriores devem ser realizadas no sentido de avaliar mais profundamente a ação dos PSG no efeito subcrônico do estresse oxidativo.
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